【求助】弱弱的问，如何挑取单菌落

培养皿中有几个大肠杆菌单菌落，直径3mm，挑取到斜面接种，用过接种针和牙签，但是都不大完美，我觉得不是“挑取”单菌落而是“蘸取”了单菌落。不知道大家是怎么操作的？如果要挑取完整的菌落，难道要把下面的琼脂也一起挑取出来？如果是挑到LB培养基的话，我习惯于用枪头，还可以顺便吹一下。一般试验什么方法都行，挑单菌落的目的就是挑选一株细菌，保证细菌的纯洁，避免其他细菌污染。所以蘸取也好，挑取也好，都没有问题！接种环、接种针、枪头和牙签都可以！一般用枪头和牙签都要把琼脂也一起挑取出来，要不不也成了蘸取！如果一定要评定一个好坏，就是挑取得菌多些，摇菌的时间短那么一点点！划线啊，建议找一本微生物学实验书看看。我的方法:把两头尖尖的牙签,用剪子齐中剪断,然后灭菌,使用时用消毒的镊子夹住尖端,用断口处沾取菌落,转接其实这个问题很简单，不管蘸取还是挑取，只要是从同一菌落中传菌就行。没有必要计较这些。此外琼脂带不带都行，还是不带好，以防污染。划线：在火焰旁，左手拿平板，右手拿接种环，取一环菌液（原污水）在平板上划线。常用的方法有如下三种：

GFP基因的克隆就是把GFP基因PCR扩增出来，再通过酶切、连接的过程，把GFP基因连接到特定载体上，然后再转化涂板。阳性转化子就是连接成功的克隆（就是你想得到的克隆）。鉴定的方法比较简单常用的就是菌落PCR。挑取单菌落PCR后电泳，看条带的大小是否正确，如果正确再送测序。你的电泳图就是看PCR的条带大小和目的产物的大小是否一致。

原因是：平板划线法不断稀释，第一次划线出生长出来的菌肯定是一条线，无法挑单菌落，但到后面稀释度很高的地方，就是一个一个菌落的生长了，这样就可以得到单菌落了。而且单菌落上的细菌性质是一样的，DNA所处细胞期都一样便于科学研究，一个单菌落一般就是一个圆点。

单菌落是来源于单一孢子或营养细胞或一群相同的细胞，在固体培养基表面或内部形成的肉眼可见的集合体。通常细菌在固体培养基上（内）生长发育，形成以母细胞为中心的一团肉眼可见的、有一定形态、构造等特征的子细胞的集团。

扩展资料：

操作方法

根据标准要求或对污染情况的估计，选择2~3个适宜稀释度，分别在制10倍递增稀释的同时，以吸取该稀释度的吸管移取1ml稀释液于灭菌平皿中，每个稀释度做两个平皿。将凉至46℃营养琼脂培养基注入平皿约15ml，并转动平皿，混合均匀。

同时将营养琼脂培养基倾入加有1ml稀释液（不含样品）的灭菌平皿内作空白对照。待琼脂凝固后，翻转平板，置36±1℃温箱内培养48±2h，取出计算平板内菌落数目，乘以稀释倍数，即得每克（每毫升）样品所含菌落总数。

参考资料来源：百度百科-单菌落

参考资料来源：百度百科-菌落

可以用镊子夹着白枪尖挑取平板上单个菌落，然后把白枪尖扔到液体培养基中，直接摇菌！

微生物试验培养放大一般强调单一菌落来源，这样是为了保证样品的均一性。所以还是应该挑1个单菌落于50ml的液体培养基中小锥形瓶中，然后将这1瓶中的分到4个200ml的大锥形瓶中。

两次。

单菌落的获得要经过两次培养，第一次培养是进行接种，将待检样品通过无菌工具（如无菌环或无菌针）接种到含有营养物质的培养基上，这样就可以使细菌在培养基上生长繁殖。第二次培养是进行分离，将第一次培养所得的细菌涂抹在含有营养物质的固体培养基上，等待细菌生长形成菌落。这时，每个菌落中只包含同一种细菌，即为单个菌落。

单菌落就是单个细菌形成的菌落，是用于计算细菌数量的一种方法。

如果你接种的足够稀释的话（这个纯粹凭经验了），一个菌落就是单菌落。

描述内容：菌落大小，颜色，形状（边缘是否规则，中心是否凹凸），粘稠或者干燥，与培养基结合是否紧密，是否有可见孢子粉，气味。

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