293细胞的形态特点

293细胞的形态特点,第1张

上皮细胞

致瘤性 +

产物或抗原 大T抗原

染色体核型 亚三倍体人细胞系染色体众数为64,30%的细胞有64 条染色体。4.2%的细胞染色体数目更多。多数细胞der⑴t(115) (q42q13),der⒆t(319) (q12q13),der⑿t(812) (q22p13),还有四条标记染色体,有的细胞另有5条标记染色体。der⑴与M8 (or Xq+)常常成对出现。N17 与 N22各有四条。值得注意的是多数细胞有三条X染色体,两条Xq+,一条Xp+。 细胞名称 293 和 293T 种属 人 组织来源  形态特点 上皮细胞 致瘤性 + 产物或抗原 大T抗原 染色体核型 亚三倍体人细胞系。染色体众数为64,30%的细胞有64 条染色体。4.2%的细胞染色体数目更多。多数细胞der⑴t(115) (q42q13),der⒆t(319) (q12q13),der⑿t(812) (q22p13),还有四条标记染色体,有的细胞另有5条标记染色体。der⑴与M8 (or Xq+)常常成对出现。N17 与 N22各有四条。值得注意的是多数细胞有三条X染色体,两条Xq+,一条Xp+。 生长特性 粘附 文献评价 293细胞系是原代人胚肾细胞转染5型腺病毒(Ad 5) DNA的永生化细胞。[RF32725]

表达转染的腺病毒5的基因。[RF32725]

早期报道认为此细胞含有Ad 5基因组左端和右端[RF32764],现已清楚仅含有左端序列。[RF50113]

此细胞系人腺病毒滴度高。

室温不贴壁,37℃几日后重新贴壁。

表达由整合素beta-1 亚基与玻基结合素受体 alpha-v 亚基组成的玻基结合素细胞表面受体. [RF33793]

The Ad5 insert was cloned and sequenced,and it was determined that a colinear seqment from nts 1 to 4344 is integrated into chromosome 19 (19q13.2). 传代 293:弃培养基,含0.25% 胰酶,0.03% EDTA 消化液洗涤,弃去,加1-2ml消化液室温或37℃消化。

加入新鲜培养基,吸出,分到新培养皿中。一传二至一传四。

293T:生长快,通常倍增时间不到一天。每3~4 天1:10至1:20稀释,5% CO2条件下培养。细胞贴壁疏松,可只用EDTA消化,不要用胰蛋白酶过度消化。 培养基更换 每2-3天一次 冻存液 95%培养基;5%,DMSO;culture medium 95%DMSO,5%;50%培养液,10%DMSO, 40%血清。 培养条件 ATCC培养基:90%的MEM Eagle,加入2mM L-谷氨酰胺,1.5g/L碳酸氢钠,0.1 mM必需氨基酸,1.0 mM 丙酮酸钠;10%加热灭活的马血清

37℃培养

293和HEK293是同一种细胞,它们的全称是Human Embryonic Kidney 293 cell 即人类胚胎肾细胞。

293还有一种衍生的293T细胞:

293细胞中转入SV40T-antigen基因形成的高转衍生株,即为293T细胞系。这使得包含SV40ori的质粒能够在该细胞系中显著扩增,从而促进表达载体的扩增,促进蛋白的表达。

293T细胞除了可用于各类基因表达及蛋白生产,还可用于高滴度逆转录病毒及其他病毒生产,如腺病毒及其他哺乳动物病毒。


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