用牛乳腺生物反应器生产人生长激素流程图

（1）由RNA为模板合成DNA的过程称为逆转录，该过程需要逆转录酶．由于基因的选择性表达，由细胞中的mRNA通过逆转录合成的DNA只是细胞中的部分基因，因此③是cDNA文库．基因组文库中的基因含有启动子．

（2）大量扩增目的基因可采用的方法是PCR技术．

（3）图是利用牛乳腺生产人生长激素，过程b表示目的基因导入受体细胞，④为牛的受精卵，常用的方法为显微注射法．图示过程中，为使人生长激素基因在牛乳腺细胞中表达，需将该基因与乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起．

（4）检测人生长激素基因在牛的乳腺细胞中是否转录需用分子杂交法．

故答案为：

（1）逆转录　cDNA文库　目的基因Ⅰ

（2）PCR技术

（3）受精卵　显微注射法　乳腺蛋白基因的启动子

（4）分子杂交

（1）含目的基因的外源DNA分子上有PstⅠ、SmaⅠ、AluⅠ三种限制酶切割位点，但用AluⅠ切割会破坏目的基因，单独用PstⅠ切割会导致目的基因或质粒自身环化，也会导致目的基因和载体的黏性末端发生任意连接，因此为了避免目的基因和载体在酶切后产生的末端发生任意连接，在此实例中，应该选用限制酶PstⅠ、SmaⅠ分别对含人胰岛素基因的DNA、质粒进行切割．要使人胰岛素基因在奶牛乳腺中特异表达，应将人胰岛素基因与奶牛乳腺蛋白基因启动子等调控元件重组在一起．

（2）①过程为超数排卵，常用促性腺激素处理奶牛A使其排出更多的卵子．精子需经获能处理后，才可以受精．在卵黄膜与透明带的间隙可以看到两个极体，说明卵子发生受精．

（3）为了使胚胎移植能成功，需要对**奶牛C进行同期发情处理，使之与供体的生理状况保持相同．

（4）若要大量获得胰岛素基因，可使用PCR技术进行体外扩增目的基因，该技术需要缓冲液、四种脱氧核苷酸、目的基因、两种引物及耐高温的DNA聚合酶．

故答案为：

（1）SmaI和PstI 奶牛乳腺蛋白基因启动子

（2）促性腺激素 获能 在卵黄膜与透明带的间隙可以看到两个极体

（3）同期发情

（4）PCR技术 耐高温的DNA聚合酶

（1）基因表达载体包括：目的基因、启动子、终止子和标记基因；显微注射法是将目的基因导入动物细胞最有效的方法；由于只有母羊才能分泌乳汁，因此研制“崂山奶山羊乳腺生物反应器”时需对山羊胚胎进行性别鉴定，应将目的基因导入雌性胚胎细胞中．

（2）动物细胞培养的条件：无菌、无毒；适宜的温度和pH；一定的气体环境；营养充足等条件．

（3）来自同一胚胎的后代具有相同的遗传物质，因此要获得来自同一胚胎、有相同遗传性状的多只奶山羊，可在移入**母羊体内前，采用胚胎分割方法来提高繁殖率．

（4）目的基因成功地导入并在崂山奶山羊乳腺中得以表达（或崂山奶山羊乳腺已经合成出三种药用蛋白β一干扰素、乙肝表面抗原、抗凝血酶Ⅲ），这是该项目成功通过鉴定的关键．

（5）由题干信息可知，该科技成果的研究过程运用了基因工程、细胞工程、胚胎工程技术．

故答案为：

（1）终止子   标记基因     显微注射    性别

（2）适宜的温度和pH气体环境

（3）胚胎分割

（4）目的基因成功地导入并在崂山奶山羊乳腺中得以表达（或崂山奶山羊乳腺已经合成出三种药用蛋白β一干扰素、乙肝表面抗原、抗凝血酶Ⅲ）

（5）基因工程、细胞工程、胚胎工程

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