生物化学的“Tm”一般表示DNA熔解温度。
1、Tm值的定义:
Tm值就是DNA熔解温度,指把DNA的双螺旋结构热变性过程中紫外吸收值达到最大值的1/2时的温度。不同序列的DNA,Tm值不同。DNA中G-C含量越高,Tm值越高,成正比关系。
2、影响Tm值的因素:
①DNA碱基组成:C-G含量越多,Tm值越高;A-T含量越多,Tm值越低。
②溶液的离子强度:在低离子强度中,Tm较低,解链的温度范围较宽;在高离子强度中,Tm值较高,解链的温度范围较窄。
③PH值:当溶液的PH值在5~9范围内,Tm值变化不明显;当PH>11或PH<4时,Tm值变化明显。
④变性剂:各种变性剂主要是干扰碱基堆积力和氢键的形成而降低Tm值。
⑤DNA双链自身的长度。
3、Tm值计算方法:
Tm计算公式为:Tm = 815 + 166 x Log10[Na+] + 041 (%GC) – 600/size
公式中,Size = 引物长度。
4、Tm熔融温度:
熔融温度在溶液中通过绘制OD相对于温度来确定。 S形曲线的中间点是熔融温度。熔点的其他估计基于近邻分析(由Genosys5审查)已被确定为DNA3或RNA4。布雷斯劳尔,等[3]发现,熔化DNA双链的行为是其一级序列可预测的。
Tm值与离子强度的关系,描述正确的是()
A离子强度较低的溶液中,DNA的溶解温度较低
B离子强度较低的溶液中,DNA的溶解温度范围较窄
C离子强度较高的溶液中,DNA分子相对稳定
D离子强度较低的溶液中,DNA分子相对稳定
正确答案:离子强度较低的溶液中,DNA的溶解温度较低;离子强度较低的溶液中,DNA的溶解温度范围较窄;离子强度较高的溶液中,DNA分子相对稳定
1一般来说,较低的退火温度可以提高pcr反应的敏感性但特异性较差;而较高的退火温度则可以提高pcr的特异性但却降低了扩增效率。通常引物与模板的退火温度在45-55度。
2优化退火温度最好的方法是设置一系列对照反应,即通过在低于计算出的引物Tm值2-10度的温度范围内,进行退火的一系列平行反应来确定最佳退火温度。也可以通过touch down pcr来设定退火温度,得到最佳退火温度。
影响Tm值的因素有…… 选B,GC间有三个氢键,AT间两个,所以,GC含量越高,TM值越大。
生物化学的Tm 表示的是什么…… 生化里的Tm一般表示DNA熔解温度,指把DNA的双螺旋结构降解一半时的温度。不同序列的DNA,Tm值
核酸中影响Tm值的因素有哪些…… DNA熔解温度,指把DNA的双螺旋结构降解一半时的温度。不同序列的DNA,Tm值不同。DNA中G-C
影响DNA变性溶解Tm值因素有哪些及其作用…… 您好!影响Tm值因素有 ① 外部因素:pH、离子强度。pH过高或者过低都会降低Tm值。随着溶剂内离子
请问什么是C0t1/2影响因素又是什么呢C0t1/2和Tm值的关系是什么呢…… 紫外吸收值达到最大值的50%时的温度称为 DNA 的解链温度(Tm) ; 复性的分数C/C0是起始浓
用olligo设计引物时出现大小Tm值什么意思…… 退火温度,可作为PCR退火温度的参考值,PCR引物如果由上海生化生工合成,建议Tm-5℃,如果由英俊
影响DNA变性溶解Tm值因素有哪些及其作用…… 影响DNA Tm大小的因素:DNA的均一性;G—C的含量;介质中的离子强度。
《生物化学》:Tm值常用DNA的碱基组成分析,(G+C)%=( )×244…… Tm-693 五个字
A+T含量愈高Tm值愈低的原因是…… DNA中A,T,G,C的含量是一定的,其中A与T以两个氢键配对,G与C以三个氢键配对,当DNA双链中
急求 生物化学 查锡良版 的重点!…… 生物大分子,物质代谢,复制、转录、翻译及调控,癌基因,血液和肝的生物化学。1、影响DNA的Tm
有效退火。引物tm值过高超过会影响酶活,引物Tm值太高会影响有效退火。Tm值就是DNA熔解温度,指把DNA的双螺旋结构在热变性过程中紫外吸收值达到最大值的一半时的温度。不同序列的DNA,Tm值不同。DNA中GC含量越高,Tm值越高,成正比关系。
引物设计软件都可以给出Tm,引物长度,碱基组成,引物使用缓冲的离子强度有关
长度为25mer以下的引物,Tm计算公式为:Tm = 4℃(G + C)+ 2℃(A + T)
对于更长的寡聚核苷酸,Tm计算公式为:
Tm = 815 + 166 x Log10[Na+] + 041 (%GC) – 600/size
公式中,Size = 引物长度
DNA变性可由某些理化因素(温度、PH、离子强度等)引起,特点是双链DNA解离为单链。DNA变性只改变其二级结构,不改变它的核苷酸序列。
Tm是指融解温度,其定义是:在解链过程中,紫外吸光度的变化△A260达到最大变化值的一半时所对应的温度称为DNA的解链温度,或称融解温度(melting temperature,即Tm)
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