几个细菌培养基的作用以及原理

毕加索全名2023-05-08  17

1中国蓝平板:含有牛肉粉、蛋白胨、乳糖、琼脂、氯化钠、中国蓝、玫瑰红等成份。是一种弱选择性(亦有学者称为无抑制性)选择培养基。成份中的中国蓝为指示剂,玫瑰红为弱抑制剂,仅能抑制革兰阳性菌生长,而对大肠杆菌没有抑制作用,发酵性革兰阴性杆菌因分解乳糖能力不同,在此平板上的菌落颜色不同,便于鉴别菌种。根据菌落形态,可做出相应的处理或报告。例如:大肠埃希菌菌落呈蓝色;痢疾志贺菌呈淡红色;鼠伤寒沙门菌呈淡红色。

2巧克力平板:普通营养琼脂成份添加进氯化血红素,万古霉素,辅酶A。用途:除可以分离奈瑟菌,嗜血杆菌外,由于加入了万古霉素,可抑制绝大多数的革兰阳性菌的生长,在分离培养上具有重要意义,不能用血平板来替代。

3 TCBS:含 酵母膏粉 蛋白胨 氯化钠 柠檬酸钠 硫代硫酸钠 胆酸钠 牛胆粉 蔗糖 柠檬酸铁 溴麝香草酚兰 麝香草酚兰 琼脂;其中:氯化钠可刺激弧菌的生长;蔗糖是可发酵的糖类;胆酸钠、牛胆粉、硫代硫酸钠和柠檬酸钠及较高的pH(86)可抑制革兰氏阳性菌和大肠菌群;霍乱弧菌对酸性环境比较敏感,因此该pH值可增强其生长;硫代硫酸钠与柠檬酸铁反应作为检测硫化氢产生的指示剂;溴麝香草酚兰和麝香草酚兰是pH指示剂。利用指示剂来区分是否发酵蔗糖:副溶血性弧菌不发酵蔗糖,菌落呈蓝绿色。霍乱弧菌发酵蔗糖产酸,菌落呈**。TCBS常用于致病性弧菌的选择性分离,是GB2008、SN标准指定培养基。

4MAC平板:即麦康凯琼脂培养基,用于大肠杆菌和大肠菌群的分离培养(05药典),主要成分:蛋白胨 脙胨 猪胆盐(或牛、羊胆盐) 氯化钠 琼脂 乳糖 1%结晶紫水溶液 05%中性红水溶液。麦康凯平板的原理:利用胆盐来抑制革兰阳性细菌的生长,而对伤寒等沙门菌有促进生长的作用.利用乳糖发酵,中性红的颜色可把分解乳糖和不分解乳糖的细菌区别开.沙门菌及志贺菌呈无色菌落,大肠埃希菌呈桃红色菌落.

副溶血性弧菌在TCBS培养基上典型特征

典型霍乱弧菌菌落为**,扁平,真径 2-3mm ;副溶血弧菌菌落呈圆形,边缘整齐、湿润、稍混浊、半透明,多数具尖心、斗笠状,蓝绿色菌落,直径 2-4mm 。

1The way to configurate TCBS agar culture-medium:82g of TCBS is weighted before being dissolved in 1000ml distilled waterAfter half-an-hour boil in water,the solute shalln't be poured into sterile vessel until a cooling of 50C

在培养基平板上长出来的菌落,仅仅从颜色上是不能判断是什么细菌的,必须通过详细的细菌生化反应鉴定才能明确是什么细菌。

因为这个平板是含有蔗糖的,如果平板上的细菌为**,那么只能说明,这一个菌落是发酵蔗糖大,如果不发酵蔗糖将形成绿色的菌落。虽然说这些现象可以作为判断细菌的依据,但只能提供线索,不能最终判断是什么细菌。

应该不可以,以下是标准技术规程:

弧菌数量—平板计数法

培养基

—— 计数培养基BTB:牛肉膏30g, 蛋白胨100g,蔗糖150g,氯化钠200g,Teepol 10g, 溴麝香草酚蓝006mg,蒸馏水1000mL。配制方法:将上述数量的牛肉膏、蛋白胨、蔗糖、氯化钠和Teepol加热溶解于1000mL蒸馏水中, 用16%的氢氧化钠调整pH为78,再将溴麝香草酚蓝按上述量溶解其中。分装于试管(每管5mL)中,塞棉塞,包装后于115℃高压蒸气灭菌20min, 然后于冰箱中冷藏备用。

—— 平板分离培养基TCBS:蛋白胨100g, 酵母膏50g,柠檬酸钠100g,硫代硫酸钠100g, 蔗糖200g,胆盐80g, 氯化钠100g,柠檬酸铁10g, 溴麝香草酚蓝004g,麝香草酚蓝004g,琼脂15g,蒸馏水1000mL。配制方法:将上述数量的蛋白胨、酵母膏、柠檬酸钠、硫代硫酸钠、蔗糖、胆盐、氯化钠、柠檬酸铁、溴麝香草酚蓝和麝香草酚蓝加热溶解于1000mL蒸馏水中,调节pH为86,在加热至沸腾。然后冷却至55℃, 倾注无菌培养皿即可。该培养基不需要高压灭菌。

—— PAC斜面培养基:蛋白栋50g,酵母膏25g, 葡萄糖10g,氯化钠100g, 琼脂150g,蒸馏水1000mL。配制方法:将上述量蛋白栋、酵母膏、葡萄糖、氯化钠和琼脂加热溶解于1000mL蒸馏水中, 调节pH为70,分装于试管(每管5mL)中, 塞棉塞,包装后于高压蒸汽灭菌锅中115℃灭菌20min。灭菌后立即取出装有上述培养基的试管,倾斜放置于实验台面上,使其冷却后培养基在试管内形成斜面。放置冰箱中冷藏备用。

—— 弧菌的分离和计数:采用9管“MPN”法以3个不同稀释度(原水样、10-1和10-2)的水样接种于BTB培养液的试管中, 37℃培养18h, 把阳性管中的菌液于TCBS平板上划线分离, 平板放进培养箱里, 于37℃培养18h,将出现的绿色、蓝绿色和**菌种接种于PCA斜面上保存。分离菌株首先经革兰氏染色、氧化酶、运动性和0/129弧菌素敏感实验等,符合弧菌特征的菌株,视其来源的“MPN”管数, 查“MPN”表进行计数。

1中国蓝平板:含有牛肉粉、蛋白胨、乳糖、琼脂、氯化钠、中国蓝、玫瑰红等成份。是一种弱选择性(亦有学者称为无抑制性)选择培养基。成份中的中国蓝为指示剂,玫瑰红为弱抑制剂,仅能抑制革兰阳性菌生长,而对大肠杆菌没有抑制作用,发酵性革兰阴性杆菌因分解乳糖能力不同,在此平板上的菌落颜色不同,便于鉴别菌种。根据菌落形态,可做出相应的处理或报告。例如:大肠埃希菌菌落呈蓝色;痢疾志贺菌呈淡红色;鼠伤寒沙门菌呈淡红色。2巧克力平板:普通营养琼脂成份添加进氯化血红素,万古霉素,辅酶A。用途:除可以分离奈瑟菌,嗜血杆菌外,由于加入了万古霉素,可抑制绝大多数的革兰阳性菌的生长,在分离培养上具有重要意义,不能用血平板来替代。

3 TCBS:含 酵母膏粉 蛋白胨 氯化钠 柠檬酸钠 硫代硫酸钠 胆酸钠 牛胆粉 蔗糖 柠檬酸铁 溴麝香草酚兰 麝香草酚兰 琼脂;其中:氯化钠可刺激弧菌的生长;蔗糖是可发酵的糖类;胆酸钠、牛胆粉、硫代硫酸钠和柠檬酸钠及较高的pH(86)可抑制革兰氏阳性菌和大肠菌群;霍乱弧菌对酸性环境比较敏感,因此该pH值可增强其生长;硫代硫酸钠与柠檬酸铁反应作为检测硫化氢产生的指示剂;溴麝香草酚兰和麝香草酚兰是pH指示剂。利用指示剂来区分是否发酵蔗糖:副溶血性弧菌不发酵蔗糖,菌落呈蓝绿色。霍乱弧菌发酵蔗糖产酸,菌落呈**。TCBS常用于致病性弧菌的选择性分离,是GB2008、SN标准指定培养基。4MAC平板:即麦康凯琼脂培养基,用于大肠杆菌和大肠菌群的分离培养(05药典),主要成分:蛋白胨 脙胨 猪胆盐(或牛、羊胆盐) 氯化钠 琼脂 乳糖 1%结晶紫水溶液 05%中性红水溶液。麦康凯平板的原理:利用胆盐来抑制革兰阳性细菌的生长,而对伤寒等沙门菌有促进生长的作用.利用乳糖发酵,中性红的颜色可把分解乳糖和不分解乳糖的细菌区别开.沙门菌及志贺菌呈无色菌落,大肠埃希菌呈桃红色菌落.以上是我的整理的,希望能帮到你,若要标准的配料成份,请发邮件给我。

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