生物上的问题,你是好学生
基因表达载体的构建(核心知识)
表达载体包括:
启动子(非编码区)
终止子
插入的目的基因
标记基因
还有
复制原点
复制原点
不等同于
启动子
复制原点和启动子功能不同,缺少任何一个都不能完成基因表达载体的构建
我是这样理解的,如果有错误请原谅
因为dna复制一次，所以dna复制在每个起点只起始一次。
由于Cdk有两重作用，一是激活pre-RC，二是在cdk有活性时，阻止pre-RC的形成，故只有在G1期无CDK活性时，pre-RC才能形成，而只有在S期被激活后，才可以开始复制。这样就保证了在一个细胞周期，只有一次DNA复制发生。
DNA是双螺旋结构。
真核生物有多个复制起始位点—复制原点，而原核只有一个复制原点。
1、原核细胞：细胞壁的成分是肽聚糖,只有一种细胞器——核糖体,DNA裸露,无染色体（质）；
真核细胞：细胞壁的成分是纤维素和果胶,有多种复杂的细胞器,有染色体（质）。
2、真核生物和原核生物的复制调控不同原核生物的调控集中在复制子（一个复制单位）水平的调 控,而真核生物不但有复制子水平的调控还有染色体水平的调控和细胞水平的调控。
3、原核的DNA聚合酶III复制时形成二聚体复合物,而真核的聚合酶保持分离状态。
4、真核生物复制一旦启动,在完成本次复制前,不能在再启动新的复制,而原核复制起始位点可以连续 开始新的复制,特别是快速繁殖的细胞。
作为遗传信息载体的DNA分子，必须能进行自我复制，并把信息准确无误地分配到子代细胞中，才能保证物种的连续性。
生物界中DNA复制的方式多种多样，甚至同一细胞中存在有不同的复制方式。但有证据表明真核生物和原核生物DNA复制的基本特征是相同的。主要表现在以下三个方面：
(1)DNA的半保留复制
即在DNA复制过程中，碱基间氢键首先断裂，双螺旋解旋和分开，每条链分别作为模板，按碱基配对原则合成其互补链，从而形成两个新的双链分子。因新形成的DNA分子中，各保留一条亲代的DNA单链，故名半保留复制，也因此保证了遗传信息的稳定性。此假说最先由Waston和Crick提出，后经Meselson、Stahl(1957)设计的氯化铯密度梯度离心实验，以及Taylor(1957)、Cairns(1963)的放射自显影实验所证实，现已为大家所公认，成为原核生物和真核生物DNA复制的普遍规律。
(2)DNA的半不连续复制
1968年日本学者冈崎等提出了DNA半不连续复制的模型，后又用同位素标记技术，令人信服地解释了两条互补反向平行的DNA单链是如何同时作为模板进行复制的。他认为，在DNA复制过程中，一股模板上DNA的合成是连续的；另一模板上DNA链的合成是不连续的，是首先合成较短的DNA片段(即冈崎片断)，然后再由连接酶连成大片段。同时，不连续合成的这条链总是落后于连续合成的那条链，称为滞后链；连续合成的链称为前导链。前导链前进的方向与复制叉前进方向相同；滞后链合成方向与复制叉前进方向相反。因此，DNA聚合酶的反应方向始终保持5′～3′。
(3)DNA复制的起始、延伸和终止
许多实验表明，DNA的半保留复制是从DNA分子的特定位点开始的，即复制原点(用ori或o表示)。现已证明，除fd组噬菌体外，许多生物的复制原点都是富含A-T的区段。由于此区段的键能较低，易于形成瞬时单链，便于单链结合蛋白与之结合。
Hubermen、Riggs(1968)首次采用同位素标记放射自显影法追踪DNA复制的轨迹，表明原核生物和真核生物中普遍存在DNA双向复制。也有单向或不对称复制，这是由复制原点的性质所决定的。
原核生物和真核生物DNA的复制都是以复制子为单位进行复制的。每个复制子都含有控制复制起始的起点，可能还有终止复制的终点。同一机体各种细胞复制的速度是不变的。
现在知道，DNA复制时，需在模板上先由引物合成酶合成一段引物，然后，DNA聚合酶从引物的3'-
OH端开始合成新的DNA链。在延伸过程中，底物前体dNTP总是在DNA聚合酶的作用下逐个添加在多核苷酸链的3'-
OH端。
DNA复制是一非常复杂的酶学过程，它需要多种酶和蛋白质协同作用。原核生物和真核生物DNA复制均涉及到拓扑异构酶、解旋酶、单链结合蛋白、引物合成酶、DNA聚合酶及连接酶等酶和蛋白质的参与。
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