真核过表达质粒,原核过表达质粒的区别~急求~~

粿条2023-02-05  24

一、指代不同

1、真核过表达质粒:真核细胞表达载体之一为pEGFP-N1载体,具有对方面的优点。pEGFP-N1载体上携带有EGFP蛋白表达基因。

2、原核过表达质粒:能携带插入的外源核酸序列进入原核细胞中进行表达的载体。

二、特性不同

1、真核过表达质粒:该质粒具有很强的复制能力,可以满足随宿主细胞分裂时跟随胞质遗传给新生的子细胞,这是真核细胞表达载体保证目的基因稳定表达的因素之一。

2、原核过表达质粒:启动子是DNA链上一段能与RNA聚合酶结合并起始RNA合成的序列,它是基因表达不可缺少的重要调控序列。没有启动子,基因就不能转录。由于细菌RNA聚合酶不能识别真核基因的启动子,因此原核表达载体所用的启动子必须是原核启动子。

三、载体构建不同

1、真核过表达质粒:,由238个氨基酸组成,分子量约为27Kd。GFPGFP在包括热、极端PH和化学变性剂等苛刻条件下都很稳定,用甲醛固定后会持续发出荧光,但在还原环境下荧光会很快熄灭。

2、原核过表达质粒:以含目的基因的克隆质粒为模板,按基因序列设计一对引物(在上游和下游引物分别引入不同的酶切位点),PCR循环获得所需基因片段。

参考资料来源:百度百科-原核表达载体

参考资料来源:百度百科-真核细胞表达载体

本质上是一样的,都是让外源性的基因序列在细胞内得到表达。但是由于目的不同,技术细节上也会有不同。过表达的质粒如果是一过性表达,不需要整合到细胞染色体组,只要有强的启动子就可以了。稳定表达的,需要有筛选基因的表达来选出整合的细胞。

而干扰质粒一般都需要是稳定的表达,现在都是通过慢病毒来实现,质粒基本都弃用了。

过表达质粒是指一种用于在细胞中大量表达指定基因的载体。过表达质粒通常由载体基因组、表达载体、基因启动子和终止子等部分组成。

过表达质粒在细胞内的表达通常需要转染细胞,即将质粒转染到细胞内。转染细胞时,通常需要使用转染试剂,例如质粒转染试剂、阴离子转染试剂等。

在转染细胞时,是否需要使用空载取决于转染试剂的种类。一些转染试剂,例如质粒转染试剂,可能会在转染过程中产生一定的压力,因此可能会需要使用空载来平衡压力。


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