一般荧光染色可以放多久

一般荧光染色可以放2年以上。根据查询相关资料信息：荧光染色在密封、干燥、温度适宜环境下都可以保存2年以上。自身容易被氧化发黄荧光剂是一种荧光染料，很多工厂为了增加产品的白度，在卫生巾中私自添加这种国际上严禁使用的染料。将卫生巾在紫外光线下（如验钞机的紫外灯）照射，看到背胶表面发出明亮的荧光，则含有荧光染色。荧光染色既然被列为潜在致癌因素之一。

细胞Ki67染色，应该是核定位蛋白，却总是染色到胞质，尝试过很多方法，包括抗体稀释液全部用03%TritonX-100,未做封闭，延长4度条件下一抗孵育时间至48h，改用37度水浴孵育一抗还是没有明显的改善，不知道怎么该处理。

现附上目前实验的步骤：

1、细胞用PBS清洗

2、4%多聚甲醛室温固定10min

3、PBS清洗5min 3次

4、03%TritonX-100室温破膜30min

5、吸去多余的破膜液，孵一抗4度过夜（一抗是用03%TritonX-100稀释，Santa Cruz公司Ki67，1：200）

6、PBS清洗5min 3次

7、03%TritonX-100稀释二抗，室温孵育2h

8、复染DAPI

9、PBS清洗5min3次

10、甘油封片

题主是否想问“荧光染色为什么看不到红光”因为荧光染料是来观察细胞和组织结构的。荧光染料在受到激发光照射后，会发出荧光信号，从而使细胞和组织的结构变得更加清晰可见。荧光染色的荧光信号分为多种颜色，其中红光是其中的一种，因此，在荧光染色中是可以看到红光的。

10－3～10－5mol/L。

根据荧光素使用说明书显示，荧光素染色的应用浓度一般为10－3～10－5mol/L。

荧光素又名荧光黄、荧光生、荧光红。有两种变体：稳定的红色变体B及**变体A。分子式为C20H12O5，分子量为33231。

一、两者的应用不同：

1、DAPI的应用：可以用于活细胞和固定细胞的染色。

2、hoechst的应用：主要用于活细胞标记。

二、两者的特点不同：

1、DAPI的特点：当DAPI与双股DNA结合时,在荧光显微镜观察下，DAPI染剂在358nm(紫外线)处有一个最大吸收峰，并在461nm(蓝)处有一个最大发射峰，其发射光的波长范围含盖了蓝色至青绿色，因此在荧光显微技术中DAPI被紫外线照亮且被蓝或青色滤镜检出。

2、hoechst的特点：Hoechst染料的荧光强度随着溶液pH升高而增强。

三、两者的概述不同：

1、DAPI的概述：DAPI即4',6-二脒基-2-苯基吲哚(4',6-diamidino-2-phenylindole)，是一种能够与DNA强力结合的荧光染料，常用于荧光显微镜观测。

2、hoechst的概述：Hoechst染料溶于水和有机溶剂，如二甲基甲酰胺或二甲基亚砜。浓度可高达10mg/mL水溶液可在4 °C避光保存至少6个月。长期储存于≤-20 °C。

参考资料来源：百度百科-DAPI

参考资料来源：百度百科-hoechst

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