1.DNA末端分为粘端和平端,根据碱基互补配对连接。
我们需要DNA连接酶。
2.不同的粘端原则上不能直接连接,但可以转换成钝端再连接。产生的重组分子往往会增加或减少几个碱基对,破坏原有的限制性位点,使重组的外源DNA片段无法回收;如果连接位点位于基因编码区,就会破坏阅读框架,使其无法正确表达。