对峙培养法是将分离物溶于有机试剂(如甲醇、丙酮)制成一定浓度的药液。用微量注射器(用打孔器就行)滴在直径8mm的滤纸盘上，做成一定剂量的药片(如果剂量不够，等药液干了再滴，这个可以重复)。把药片放在PDA盘子的一边。然后放入冰箱保存30分钟，让药物充分扩散。预培养测试细菌。用打孔器做一个直径5 mm的菌块，放在平板的另一面，放置48 ~ 72小时。当分离物具有抗菌活性时，菌丝体的膨胀被抑制形成抗菌区。
