大巴车凌晨2点至5点在高速上必须休息。根据《道路旅客运输企业安全管理规范》：长途客运车辆凌晨2时至5时停止运行或实行接驳运输，凌晨2点后禁止长途客车从收费站口上高速，对此时间段内正在高速公路上行驶的长途客车就近引导到服务区或客运站停车休息。从事线路固定的机场、高铁快线以及短途驳载且单程运营里程在100公里以内的客运车辆，在确保安全的前提下，不受凌晨2时至5时通行限制。
【法律依据】
《道路旅客运输企业安全管理规范》长途客运车辆凌晨2时至5时停止运行或实行接驳运输，凌晨2点后禁止长途客车从收费站口上高速，对此时间段内正在高速公路上行驶的长途客车就近引导到服务区或客运站停车休息。从事线路固定的机场、高铁快线以及短途驳载且单程运营里程在100公里以内的客运车辆，在确保安全的前提下，不受凌晨2时至5时通行限制。
1、大客车不能在高速公路上行驶的时间是凌晨两点至五点。根据相关法律规定，夜间在道路上行驶的客运车辆凌晨2点至5点必须就近停靠在安全地带。此时驾驶员要及时提醒车上旅客不要随意走动。
2、法律依据：《道路旅客运输企业安全管理规范》
第三十八条 客运企业在制定运输计划时应当严格遵守客运驾驶员驾驶时间和休息时间等规定：
（一）日间连续驾驶时间不得超过4小时，夜间连续驾驶时间不得超过2小时，每次停车休息时间应不少于20分钟；
（二）在24小时内累计驾驶时间不得超过8小时；
（三）任意连续7日内累计驾驶时间不得超过44小时，期间有效落地休息；
（四）禁止在夜间驾驶客运车辆通行达不到安全通行条件的三级及以下山区公路；
（五）长途客运车辆凌晨2时至5时停止运行或实行接驳运输；从事线路固定的机场、高铁快线以及短途驳载且单程运营里程在100公里以内的客运车辆，在确保安全的前提下，不受凌晨2时至5时通行限制。
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从西宁到塔尔寺，可先到西宁体育馆隔壁的小西门汽车站和城西的纸坊路汽车站，这里有中巴车和吉普车到湟中县。白天通常每30分钟一班，最晚一班车到晚上6点左右发出。另有夏利凑足四人发车。中巴车票价6元/人，出租车票价8元/人。天黑前都有车返回西宁。 航空 从西宁机场到市中心路程29公里，民航班车票价25元，如果坐夏利出租车价格在150元左右。国内航线中开往北京、西安的飞机每天都有航班；其余开往上海、成都、重庆、敦煌、格尔木、广州、昆明、拉萨、深圳、乌鲁木齐的航班不是每天都有，出发前要咨询一下。 铁路 西宁是兰青、青藏铁路交汇处，铁路交通四通八达，有直达北京、上海、西安、青岛、格尔木等地的列车。省内有支线通往大通、柴达木、茶卡等地。西宁火车站在祁连路 公路 有青藏、青新、青川等省内外交通干线，有长途汽车通往省内外主要市、县。西宁长途汽车站位于建国路北头，距离火车站以南约600米 客车以开往甘肃省各地为主，也有车到格尔木和茶卡等地，班次频密，车票并不紧张，只要提前一天预售便可。 长途车站也有市郊线前往湟中塔尔寺、老爷山等地，购票可往西宁西关大街纸坊街郊县市区汽车站。另外在西宁宾馆外，有私营中巴前往塔尔寺及租车前往各地，但需议价及下车付款。 市内交通 有数十条公共汽车线路，连接市内及市郊，还有数百辆出租车恭候大街小巷，通常都为夏利。起步价6元/3公里，每公里1.1元。
