1、开光谱仪电源
2、开计算机电源
3、在文件管理器中用鼠标指按UV WinLab图标,此时出现UV WinLab的应用窗口,仪器已准备好,可选用适当方法进行分析操作。
一、方法:在分析中必须对分光光度计设定一些必要的参数,这些参数的组合就形成一个“方法”。Lambda系列UV WinLab软件预设四类常用方法。
1)扫描(SCAN),用以进行光谱扫描。
2)时间驱动(TIME DRIVER),用以观察一定时间内某种特定波长处纵坐标值的变化,如酶动力学。
3)波长编程(WP)用以在多个波长下测定样品在一定时间内的纵坐标值变化,并可以计算这些纵坐标值的差或比值。
4)浓度(CONC)用以建立标准曲线并测定浓度。
2.1 进入所需方法,在方法窗口中选择所需方法的文件名。
二、方法的设定
扫描、波长编程及时间驱动各项方法可根据显示的参数表,逐项按需要选用或填入,并可参考提示。
浓度
浓度方法窗口下方标签较多,说明做浓度测定时需要参数较多。用鼠标指按每一标签,可翻出下页,其上有一些需要测定的参数。必须逐页设定。
三、工具条
1)SETUP
当所需的各项参数都已在参数中设好后,必须用鼠标指按SETUP,才能将仪器调整到所设状态。
2)AUTOZERO 用鼠标指按此键,分光光度计即进行调零(在光谱扫描中则进行基线校正)。
3)START 用鼠标指按此键,光度计即开始运行所设定的方法。
四、方法运行
1)扫描,时间驱动,波长编程方法选好后,先放入参比溶液,按AUTOZERO键,进行自自动校零或背景校正结束后再放入样品,按START,分光光度计即开始进行,同时屏幕上出现图形窗口,将结果显示出来。
2)浓度
3)制订标准曲线
(1)方法选好后,确认各项数据正确,特别是REFS页中第一行要选中右上角的“edit mode”。再放入参比溶液,按AUTOZERO键自动校零或背景校正。
(2)按setup,待该图标消失后,再按“start”,按提示依次放入标准色列的各管溶液,每次都按提示进行操作。
(3)标准色列测定完毕后,屏幕上出现calibgraphwindow,显示拟合的标准线,并标出各项标准管的位置,屏幕下方还有一条ConcentraTIon mode的对话框,可以用来修改拟合的曲线类型(按 change calbraTIon),或修改标准溶液的任何一管(replace),或取消某一管(delete),或增加标准溶液管数(add)。如过已经满意,则按analyse sample键,进入样品测定窗口。
(4)标准曲线有关的各项数据,均在calibresultwindow中,可用鼠标将其调出观察。其中包括每个标准溶液的具体数据,标准曲线的回程方程式,相关系数,残差。
五、样品浓度测定
刚制定好的标准曲线接着进行样品浓度测定时
1)只需在concentraTIon mode对话框按analyse sample键,进入样品测定窗口。
2 )按设定的样品顺序放入各样品管,每次按提示进行操作。
3 )屏幕上出现结果窗口,结果数据将依次显示在样品表中的相应位置。
(1)利用原有的标准曲线接着进行样品浓度测定时
(2)调出所测定样品的浓度方法文件,首先调出refs页,将原设edit mode选项取消,改设左上角的using exiting calibration。重新将方法存盘,则今后再调用时即不需再作修改。
(3) 在sample页中按要求重设各种样品名称机样品信息。
(4)按工具条中setup键,将主机设到该方法所设定的条件。
(5)将参比溶液放入比色室,按autozero键做背景校零。
(6) 按start键,按设定的样品顺序放入各样品管,每次按提示进行操作。
(7) 屏幕上出现结果窗口,结果数据将依次显示在样品表中相应位置。
六、关机
1)将方法及数据存盘
2)关闭方法窗
3)退出UV WinLab
4) 取出样品及参比溶液
5)清洁光谱仪,特别是样品室
6)关闭光谱电源
7)关闭计算机电源
根据现代光谱仪器的工作原理,光谱仪可以分为两大类:经典光谱仪和新型光谱仪。经典光谱仪器是建立在空间色散原理上的仪器:新型光谱仪器是建立在调制原理上的仪器.经典光谱仪器都是狭缝光谱仪器。调制光谱仪是非空间分光的,它采用圆孔进光根据色散组件的分光原理,光谱仪器可分为:棱镜光谱仪,衍射光栅光谱仪和干涉光谱仪.光学多道OMA(Optical Multi-channel Analyzer)是近十几年出现的采用光子探测器(CCD)和计算机控制的新型光谱分析仪器,它集信息采集,处理,存储诸功能于一体。由于OMA不再使用感光乳胶,避免和省去了暗室处理以及之后的一系列繁琐处理,测量工作,使传统的光谱技术发生了根本的改变,大大改善了工作条件,提高了工作效率:使用OMA分析光谱,测盆准确迅速,方便,且灵敏度高,响应时间快,光谱分辨率高,测量结果可立即从显示屏上读出或由打印机,绘图仪输出.目前,它己被广泛使用于几乎所有的光谱测量,分析及研究工作中,特别适应于对微弱信号,瞬变信号的检测。
光谱分析仪的分析原理是将光源辐射出的待测元素的特征光谱通过样品的蒸汽中待测元素的基态原子所吸收,由发射光谱被减弱的程度,进而求得样品中待测元素的含量,它符合郎珀-比尔定律 A= -lg I/I o= -LgT = KCL 式中I为透射光强度,I0为发射光强度,T为透射比,L为光通过原子化器光程由于L是不变值所以A=KC。
物理原理
任何元素的原子都是由原子核和绕核运动的电子组成的,原子核外电子按其能量的高低分层分布而形成不同的能级,因此,一个原子核可以具有多种能级状态。
能量最低的能级状态称为基态能级(E0=0),其余能级称为激发态能级,而能最低的激发态则称为第一激发态。正常情况下,原子处于基态,核外电子在各自能量最低的轨道上运动。
如果将一定外界能量如光能提供给该基态原子,当外界光能量E恰好等于该基态原子中基态和某一较高能级之间的能级差E时,该原子将吸收这一特征波长的光,外层电子由基态跃迁到相应的激发态,而产生原子吸收光谱。
电子跃迁到较高能级以后处于激发态,但激发态电子是不稳定的,大约经过10^-8秒以后,激发态电子将返回基态或其它较低能级,并将电子跃迁时所吸收的能量以光的形式释放出去,这个过程称原子发射光谱。可见原子吸收光谱过程吸收辐射能量,而原子发射光谱过程则释放辐射能量。
光谱分析仪原理是将成分复杂的复合光分解为光谱线并进行测量和计算的科学仪器,被广泛应用于辐射度学分析、颜色测量、化学成份分析等领域,在冶金、地质、水文、医药、石油化工、环境保护、宇宙探索等行业发挥着重要作用。
光谱分析仪特点
在照明行业,通常使用光谱仪来测量光源的光色参数,光谱仪一般由分光系统、接收系统和数据处理系统组成,其工作原理是将光源发出的复色光按照不同的波长分离出来,配合各种光电探测器件对谱线强度进行测量。
获得光谱功率(辐射)分布,再计算出色品坐标、色温、显色指数、光通量、辐射通量等光色性能参数,分光系统通常做成整体式结构,称为单色仪或多色仪,单色仪是输出单色谱线的光学仪器,通常与PMT探测器为核心的接收系统配套工作,再由数据处理系统对测量信号进行计算处理,各部分相对独立。