DPPH是一种很稳定的氮中心的自由基,它的稳定性主要来自3个苯环的ππ共-轭作用及空间障碍,使夹在中间的氮原子上不成对的电子不能发挥其应有的电子成对作用。作为一种稳定的自由基,DPPH可以捕获(“清除”)其他的自由基。
因此通过加入DPPH后观察某一化学反应的速率是否减慢,来作为这一反应是否具有自由基反应本质的指标。
由于DPPH自由基在以300~400之间为中心处具有强烈的吸收,因此在溶液中呈现深紫色,并且在被中和之后会变为无色或浅黄色。利用这一特性可以直观地检测反应的过程,通过记录DPPH在在520nm吸光度值或者EPR信号的变化可以得到初始自由基的量。
扩展资料:
DPPH法于1958年被提出,广泛用于定量测定抗氧化能力。此法是根据DPPH自由基有单电子,在520nm处有一强吸收,其醇溶液呈紫色。
抗氧化剂(或称自由基清除剂)能使单电子配对,从而使A520nm值降低,溶液褪色。由于这种变化其接受电子数量成定量关系,因而可用比色法(如分光光度计)进行测量。
DPPH的信号一般聚合为单一的线,在更宽的功率范围内,信号强度与微波功率的平方根呈线性关系,因此用DPPH作为校正的标准物质十分方便。
此外,DPPH也可以用于分光光度法的检测。DPPH在520nm的吸光度(A520nm),可以反映其浓度。因此,一旦A520nm值降低,则表明DPPH自由基被清除。
参考资料来源:百度百科-DPPH
DPPH是一种很稳定的氮中心的自由基,它的稳定性主要来自3个苯环的ππ共-轭作用及空间障碍,使夹在中间的氮原子上不成对的电子不能发挥其应有的电子成对作用。作为一种稳定的自由基,DPPH可以捕获(“清除”)其他的自由基。自由基,化学上也称为“游离基”,是指化合物的分子在光热等外界条件下,共价键发生均裂而形成的具有不成对电子的原子或基团。(共价键不均匀裂解时,两原子间的共用电子对完全转移到其中的一个原子上,其结果是形成了带正电和带负电的离子,这种断裂方式称之为键的异裂。)在书写时,一般在原子符号或者原子团符号旁边加上一个“·”表示存在未成对的电子。如氢自由基(H·,即氢原子)、氯自由基(Cl·,即氯原子)、甲基自由基(CH3·)。
DPPH法于1958年被提出,广泛用于定量测定生物试样、纯化合物、提取物的体外抗氧化能力。DPPH清除法的原理
作为一种稳定的自由基,DPPH能在有机溶剂中稳定存在,其醇溶液呈紫色,且需低温避光储藏,具有单一电子,故能接受一个电子或氢离子,在波长为517nm下具有最大吸收。有自由基清除剂存在时,DPPH的单电子被捕捉而使其颜色变浅,在最大光吸收波长处的吸光值下降,且下降程度呈线性关DPPH清除法的缺陷
由于DPPH是亲脂的,因而,缺乏生物相关性。PTIO自由基清除法被认为是理想的替代法。此法既可在水溶液中、也可以在pH7.4缓冲溶液中进行 。