台盼蓝染液可用于巨噬细胞的活体染色剂。
台盼蓝,是细胞活性染料,常用于检测细胞膜的完整性,检测细胞是否存活。活细胞不会被染成蓝色,而死细胞会被染成淡蓝色,台盼蓝可被巨噬细胞吞噬。
借助台盼蓝染色可以非常简便、快速地区分活细胞和死细胞。台盼蓝是组织和细胞培养中最常用的死细胞鉴定染色方法之一。注意凋亡小体也有台盼蓝拒染现象。台盼蓝染色后,通过显微镜下直接计数或显微镜下拍照后计数,就可以对细胞存活率进行比较精确的定量。
用品: 1. 4%台盼蓝母液:称取4g台盼蓝,加少量蒸馏水研磨,加双蒸水至100ml,用滤纸过滤,4度保存。使用时。用PBS稀释至0.4%。 2. 吸管、血细胞计数板、显微镜。
步骤: 1、制备单细胞悬液。并作适当稀释(10 *6 细胞/ml)
2、染色:取9mL细胞悬液移入试管中,加1mL0.4%台盼蓝溶液,混匀。
3、观察 注意事项:台盼蓝染细胞时,时间不宜过长。否则,部分活细胞也会着色,会干扰计数。 台盼蓝主要用来鉴定原代培养细胞时,细胞分离后的存活情况,用0.4%台盼蓝直接染色,在显微镜下观察即可,活细胞不被染色。方便易用,因此在实验室中比较常用,尤其在心肌细胞原代培养中。 台盼兰染色法价格低廉,操作简单,又不用无菌操作,做这个实验只要是把显微镜调好了,细胞浓度调好了就不会有问题,是一个养细胞的入门实验,所以很适合初学者做。
台盼蓝染色原理:细胞损伤或死亡时,台盼蓝可穿透变性的细胞膜,与解体的DNA结合,使其着色。而活细胞能阻止台盼蓝进入细胞内。台盼蓝是细胞活性染料,常用于检测细胞膜的完整性,还常用于检测细胞是否存活。活细胞不会被染成蓝色,而死细胞会被染成淡蓝色。
正常的活细胞,胞膜结构完整,能够排斥台盼蓝,使之不能够进入胞内。而丧失活性或细胞膜不完整的细胞,胞膜的通透性增加,可被台盼蓝染成蓝色。通常认为细胞膜完整性丧失,即可认为细胞已经死亡。因此,借助台盼蓝染色可以非常简便、快速地区分活细胞和死细胞。