在某一pH的溶液中，氨基酸解离成阳离子和阴离子的趋势及程度相等，成为兼性离子，呈电中性，此时的溶液pH称该氨基酸的等电点。
氨基酸是两性电解质，在碱性溶液中表现出带负电荷，在酸性溶液中表现出带正电荷，在某一定pH溶液中，氨基酸所带的正电荷和负电荷相等。
氨基酸的等电点主要用于测定氨基酸的含量：
水溶液中的氨基酸为兼性离子，因而不能直接用碱滴定氨基酸的羧基，甲醛可与氨基酸上的—N+H3结合，形成—NH—CH2OH、—N(CH2—OH)2 等羟甲基衍生物，使N+H3上的H+游离出来，这样就可以用碱滴定N+H3放出H+，测出氨基氮，从而计算氨基酸的含量。
若样品中只含有单一的已知氨基酸，则可由此法滴定的结果算出氨基酸的含量，若样品中含有多种氨基酸（如蛋白质水解液），测不能由此法算出氨基酸的含量。
脯氨酸与甲醛作用后，生成的化合物不稳定，导致滴定后结果偏低；酪氨酸含酚基结构，导致滴定结果偏高。
等电点：指氨基酸处于净电荷为零的兼性离子状态时的pH。等电点与离子浓度无关，只决定于等电兼性离子两侧的pKa值；等电点的计算
氨基酸在等电点状态下，溶解度最小
不同pH时的电泳行为
pH>pl时，带负电荷，向正极移动
pH=pl时，净电荷为零
pH<pl时，带正电荷，向负极移动
氨基酸的等电点是某一pH的溶液中，氨基酸解离成阳离子和阴离子的趋势及程度相等，氨基酸是两性电解质，在碱性溶液中表现出带负电荷，在酸性溶液中表现出带正电荷，在某一定pH溶液中，氨基酸所带的正电荷和负电荷相等时的pH。
pI的计算公式：
1、对于侧链R基不解离的中性氨基酸来说，pI=1/2（pKa1+PKa2）。
2、对于有多个解离基团的氨基酸来说，只要写出它的解离公式，然后取等电兼性离子两边的pKa的平均值则得出其pI值。
注：pI值与该离子浓度基本无关，只取决于等电中性离子A0两侧的pK值。
原理
氨基酸虽然是一种两性电解质，即是酸性又是碱性，但它却不能直接用酸碱滴定来进行测量。这是因为氨基酸的酸碱滴定的等电点pH过高（12-13）或是过低（1-2）没有适合的指示剂可备选用。而向氨基酸中加入过量的甲醛，用氢氧化钠滴定时，由于甲醛可与氨基酸上的—N+H3结合，形成—NH—CH2OH、—N(CH2—OH)2等，而降低了氨基酸的碱性，相对增强了—N+H3的解离，使滴定终点移到了pH9附近，在酚酞指示剂的变色区域内，能够用酚酞作为指示剂进行滴定。
