1、选择叶片:一定要选择新鲜的叶子。一般来说,教科书说你可以使用菠菜叶。使用任何叶子都可以,但最好有新鲜的叶子。将新鲜叶片平放在载玻片上,并用刀片除去刀片的基部,页面的尖端和刀片的末端,留下小的小叶,其间具有主静脉。
2、切割植物材料:由于我们是横截面,我们可以用镊子按压材料的一端,用右手挤压刀片,沿主脉的垂直方向切割刀片。每次切割刀片时,都会卡住水,并放置薄而切割的叶子。在含有淡水的培养皿中。
3、材料选择:使用镊子从水中选择最薄的切片,将需要在幻灯片上染色的材料掉落,然后将薄的叶片切割表面平放并覆盖滑块,通过撕掉洋葱皮获得薄的外皮。
4、观察:观察完整透明刀片的横截面结构。跟随整个局部,首先找到小倍数的细胞位置,然后通过局部放大倍数调整亮度和倍数,以获得更好的视觉和清晰度。
5、清洗:洗净载玻片与培养皿,整理器材,将废物放入指定容器,养成良好的实验习惯。
玻片标本的制作方法如下:玻片标本又分为临时玻片标本(如涂片、压片、临时装片)和永久玻片标本(如永久装片、切片)。主要的制作方法有:
涂片法
涂片法是将材料均匀地涂布在载玻片上的一种制片方法。涂片材料有单细胞生物、小型藻类、血液、细菌培养液、动植物的疏松组织、精巢、花药等。
涂片时应注意:载玻片必须清洁。载玻片要持平。涂层须均匀。涂抹液滴在载玻片中间偏右,用解剖刀刃或牙签等涂匀。涂层要薄。用另一载玻片作推片,沿滴有涂抹液的载玻片面(二载玻片夹角应为30°~45°)由右向左轻轻推动,涂成均匀一薄层。
固定。如需固定可用化学固定剂或干燥法(细菌)固定。染色。细菌用亚甲基蓝,血液用瑞氏染液。染色液要盖住全部涂面。冲洗。用吸水纸吸干或烤干。封片。
压片法
压片法是将生物材料置于载玻片和盖片之间,施加一定压力,将组织细胞压散的一种制片方法。
压片法的一般过程:取出一块载玻片,在载玻片的中央滴一滴清水;将实验材料放入水滴中,镊子捣碎,另取一块载玻片,呈十字交叉压在材料上,用拇指小心按压(注意不要把载玻片压碎),将材料压散,小心将两块载玻片分开,注意移动材料的位置。
装片法
装片法是将生物材料采取整体封固制成玻片标本的方法,用此法可制成临时或永久装片。装片材料有:微小生物如衣藻、水绵、变形虫、水螅,植物的叶表皮;昆虫的翅、足、口器,人的口腔上皮细胞等。
装片法制作时应注意:
手持载玻片时,应注意持平,或放在平台上。滴水时水量要适当,以恰好被盖玻片盖满为度。应将材料用解剖针或镊子展开不使重叠,展平在同一平面上。
放盖玻片时,从一侧慢慢盖在水滴上,防止出现气泡。染色时,将一滴染色液滴在盖玻片的一侧,用吸水纸从另一侧吸引,使盖玻片下的标本均匀着色。着色后,用同样的方法,滴一滴清水,把染色液吸出后,在显微镜下观察。
切片法
切片法是从生物体上切取的薄片制成的玻片标本。因要求不同,可用刀片进行徒手切片,也可将组织块包埋于石蜡或火棉胶中或以低温冷冻,用切片机切片。切成5~10微米薄片,供光学显微镜观察。如叶脉切片和植物茎切片。
样品标本切片质量的好坏,则与技术的熟悉程度以及切片机、切片刀的好坏相关。需要注意的是,如果在进行样品标本切片时,在夏天或是秋天进行样品标本切片时,则需要在使用时添加冰块或是添加冷却剂保持石蜡的硬度。