二十分钟。
如何使用高压灭菌器
1.先将内杀菌桶取出，再将适量的水加入外锅，使水面与三角架平齐。
2.将其放回灭菌桶中，并装入要灭菌的物品。注意不要装得太挤，以免阻碍蒸汽流通，影响杀菌效果。不要让烧瓶和试管口的桶壁接触，以免冷凝水打湿袋口的纸，渗入棉塞。
3.盖上盖子，将盖子上的排气软管插入内部灭菌桶的排气槽中。然后两两对称地同时拧紧两个相对的螺栓，使螺栓的松紧一致，不允许漏气。
4.用电炉或煤气加热，同时打开排气阀，使水沸腾，以排除锅内的冷空气。冷空气完全排尽后，关闭排气阀，让锅内温度随着蒸汽压力的升高而逐渐升高。当锅内压力升至所需压力时，控制热源，维持压力所需时间，约20分钟。
5.灭菌所需时间到了，就切断电源或者关掉煤气，这样灭菌锅内的温度自然会下降。当压力表压力降至0时，打开排气阀，松开螺栓，打开盖子，取出已灭菌物品。如果压力没有降到0，打开排气阀，锅内压力会突然下降，导致容器内的培养基因内外压力不平衡而冲出燃烧瓶或试管口，造成培养基被棉塞污染。
6.将取出的灭菌培养基放入37℃培养箱中24小时。如果检查后没有杂菌生长，可以备用。
