wb是什么意思的缩写 wb的意思

wb是什么意思的缩写 wb的意思,第1张

1、网络上wb是微博的缩写。

2、微博是指一种基于用户关系信息分享、传播以及获取的通过关注机制分享简短实时信息的广播式的社交媒体、网络平台。

3、允许用户通过Web、Wap、Mail、App、IM、SMS以及用户可以通过PC、手机等多种移动终端接入,以文字、、视频等多媒体形式,实现信息的即时分享、传播互动。

WB实验是通过聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)将混合蛋白质样品分离后,利用特殊虹吸或电场装置印迹至固相介质(例如PVDF膜)上,再以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原。

与相对应的第一抗体特异性结合,之后再与酶或同位素标记的第二抗体相结合,最终通过底物显色或放射自显影来检测特异性目的基因表达的蛋白成分。

蛋白质样品制备

原始样品可为细胞、组织、培养上清、免疫沉淀或亲和纯化的蛋白,以下为定性检测目的蛋白时细胞样品的处理方法,其余的样品制备方法参阅相关文献。

1培养细胞或药物处理。

2弃培养基,用1X PBS漂洗细胞2次,去尽残留培养基。

3加入1X SDS样品缓冲液,刮落细胞,转移到Ep管。注意:冰上操作。

4超声10~15秒剪切DNA以减低样品粘性。

5煮沸样品5min。

6离心12000g,5min,取上清。

SDS-PAGE电泳

一、清洗玻璃板

二、灌胶与上样

1 玻璃板对齐后放入夹中卡紧。然后垂直卡在架子上准备灌胶。

2 配 10% 分离胶,加入TEMED后立即摇匀即可灌胶。灌胶时,可用10ml枪吸取5ml 胶沿玻璃放出,待胶面升到绿带中间线高度时即可。然后胶上加一层水,液封后的胶凝的更快。

3 当水和胶之间有一条折射线时,说明胶已凝了。再等3min使胶充分凝固就可倒去胶上层水并用吸水纸将水吸干。

4 配 4% 的浓缩胶, 加入 TEMED 后立即摇匀即可灌胶。将剩余空间灌满浓缩胶然后将梳子插入浓缩胶中。待到浓缩胶凝固后,两手分别捏住梳子的两边竖直向上轻轻将其拔出。

5 用水冲洗一下浓缩胶,将其放入电泳槽中。

6 在电泳槽的上、下槽中加入1×Tris-甘氨酸或SDS电泳缓冲液,上样。

7 连接电泳槽到电泳仪。上槽接负极,下槽接正极,通电起始电压70~ 80V,10min后100V,电泳2h或当溴酚蓝迁移至离底部1cm时,停止电泳。

转膜

1 将胶浸于转移缓冲液中平衡 10min。注意:若检测小分子蛋白,可省略此步,因小分子蛋白容易扩散出胶。

2 依据胶的大小剪取膜和滤纸6 片, 放入转移缓冲液中平衡10min。如用PVDF 膜需用纯甲醇浸泡饱和 3-5 秒钟。

3 装配转移三明治:海绵3层滤纸胶膜,3层滤纸海绵,每层放好后,用试管赶去气泡。切记:胶放于负极面(黑色面)。

4 将转移槽置于冰浴中,放入三明治(黑色面对黑色面),加转移缓冲液, 插上电极,100V,1h(电流约为 03A)。

5 转膜结束后,切断电源,取出杂交膜。

封闭与杂交

1用25ml TBS 洗膜5min,室温,摇动。

2置膜于25ml 封闭缓冲液中1h, 室温,摇动。

315mlTBS/T洗3次(5min/T)。

4加入合适稀释度的一抗,室温孵育1-2h或4°C过夜,缓慢摇动。

515ml TBS/T洗3次(5min/T)。

6加入合适稀释度的碱性磷酸酶(AP)或辣根过氧化酶(HRP)标记的二抗,室温孵育1h,缓慢摇动。

715ml TBS/T洗3次(5min/T)。

815ml TBS洗1次。5

显色

将 A、B 发光液按比例稀释混合。膜用去离子水稍加漂洗,滤纸贴角吸干,反贴法覆于 A、B 混合液滴上,熄灯至可见淡绿色荧光条带(5min 左右)后滤纸贴角吸干,置于保鲜膜内固定于片盒中,迅速盖上胶片,关闭胶盒,根据所见荧光强度曝光。

取出胶片立即完全浸入显影液中 1~2min,清水漂洗一下后放在定影液中至底片完全定影,清水冲净晾干,标定Marker,进行分析与扫描。

WB 中常见的问题以及处理办法。

一、信号强度低

信号强度低是指在正常曝光条件下得到的目的条带微小或是没有目的条带,而增加曝光时间又会招致背景高、杂带多等问题。扫除试剂质量、操作失误等方面的影响,这一类问题产生的主要缘由如下:

① 样本蛋白表达量缺乏。倡议添加蛋白表达量较高的细胞系作为阳性对照,或是恰当增加上样量以取得较高程度的信号;

② 蛋白质降解。在蛋白样品制备期间留意蛋白酶抑止剂 PMSF 的运用,所制备的样品尽快检测或妥善保管;

③ 蛋白的转膜。运用恰当孔径的膜,同时优化转膜时间,关于高分子量蛋白可能需求更长的转膜时间。

④ 抗体的运用。抗体的反响种属与实验类型需求可以满足实验的需求,此外,抗体的稀释比、孵育时间等问题也需求在实验中不时优化;

⑤ 蛋白与抗体分离率低。减少洗膜次数或缩短洗膜时间,降低洗膜液中 NaCl 浓度等;

⑥ 抗原被封锁液遮盖。换用不同的封锁液,优化封锁液中蛋白质浓度并缩短封锁时间;

⑦ 甲醇浓渡过高。会招致蛋白质与 SDS 别离,并沉淀在凝胶中,同时使凝胶收缩或变硬,从而抑止高分子量蛋白的转移。实验中可恰当降低甲醇浓度或者运用乙醇、异丙醇替代。

二、非特异性条带或条带位置不对

WB 结果中目的条带之外的条带被称为非特异性条带,有时非特异性条带很明显,却没有目的条带,这些状况对结果剖析会产生很大的干扰。普通来说惹起这类问题的主要要素有:

① 抗体的非特异性分离。通常以为,多抗的特异性不如单抗,更容易产生非特异性条带,而恰当降低抗体的浓度有助于减少杂带。同时为了扫除二抗非特异性分离的可能,倡议设二抗阴性对照;

② 样品蛋白量过高。恰当降低上样量,同时延长洗濯时间与封锁时间可防止蛋白量过高对实验结果的不良影响;

③ 蛋白质降解。会招致条带位置变化并产生更多杂带,倡议采用新颖制备的或是冻融次数较少的样品;

④ 细胞传代次数过多。会招致蛋白表达形式的分化,倡议运用原始或传代少的细胞株;

⑤ 蛋白存在复合物。有的目的蛋白会和其他蛋白分离构成复合物,招致条带位置改动,需求查阅相关文献来肯定蛋白能否会构成稳定复合物;

⑥ 蛋白存在剪接体或多种修饰方式。局部蛋白存在剪切位点,有的剪切体具有免疫活性,在 WB 中也会被检测出。此外有的目的蛋白会存在糖基化位点或其他修饰位点,条带大小可能会远超理论分子量。因而需求查阅文献或是 uniprot 来得知蛋白的剪切体大小以及修饰位点等。

三、背景过高

在局部 WB 结果中,条带之外本应是空白的背景也会有较深的颜色,对剖析结果会产生干扰,而且结果图不美观,难以用于文章发表。这种问题的可能缘由有以下几点:

① 封锁不充沛。背景过高的主要缘由之一是封锁有问题,倡议运用适宜的封锁剂(脱脂奶粉、BSA 等),优化反响浓度与封锁时间,同时留意防止呈现抗体与封锁剂的穿插反响,以及封锁剂与含有目的抗原,内源性生物素或者与抗生物素蛋白/链霉亲和素不相溶等问题;

② 洗膜不充沛。恰当增加洗膜次数弛缓冲液体积,进步吐温20的百分比可改善由洗膜不充沛招致的背景高的问题;

③ 抗体的运用。一抗浓渡过高是高背景的缘由之一,且二抗也存在与封锁剂非特异性分离的可能,因而倡议恰当优化一抗浓度,并设二抗阴性对照;

④ 曝光时间长。倡议在实验中采用适宜的曝光时间。

四、条带弥散或外形怪异

有时 WB 结果图中条带位置契合预期,但却由于条带弥散、外形怪异等要素招致无法运用,呈现这种状况多半是制胶或电泳过程出了问题,详细如下:

① 电泳时电压、电流过高。会招致条带迁移速率过快以及 SDS-PAGE 温度升高,并可能使得条带弥散、外形变形。倡议运用适宜的电泳条件并坚持低温;

② 电极不均衡。会招致条带偏斜,上样时在无样品的胶孔中参加等量样品缓冲液可防止这种状况;

③ 上样量过高,样品中盐离子浓度较大。上样量过高可能会招致条带弥散,样品中的盐离子浓度不分歧则会招致条带不齐等问题。因而在上样时需保证样品量分歧且恰当,并坚持相同的、较低的盐离子浓度。

④ 制胶问题。在配胶时一定要保证充沛混匀,平均凝胶,上样前用针头将胶孔拨正并吹出胶孔中的气泡。

⑤ 电泳缓冲液寄存过久。电泳实验中的缓冲液假如放置过久也会对结果有不良影响,因而倡议及时改换新的缓冲液。

五、膜上分布不平均的污点

有时在 WB 做出结果后,除了目的条带以外,膜上还散布着不规律的污点,对结果也会有较大的干扰。这类问题产生的主要缘由有以下几点:

① 试剂、仪器等污染。倡议在每次实验前后留意清算实验仪器,同时及时改换呈现问题的试剂;

② 转膜时有气泡。确保在转膜过程中将气泡扫除洁净;

③ 抗体孵育时与膜接触不充沛。确保在抗体孵育过程中,液体总量足够,同时将抗体平均配置,并在摇摆的条件下停止孵育;

④ 曝光时间。过度曝光会招致斑点更明显,倡议采用适宜的曝光时间;

⑤ 膜枯燥。实验中要保证有充沛的反响液,防止呈现干膜现象。

韦伯:是国际单位制中磁通量的单位,缩写Wb,是以德国物理学家威廉·韦伯的名字命名。

磁通量:设在磁感应强度为B的匀强磁场中,有一个面积为S且与磁场方向垂直的平面,磁感应强度B与面积S的乘积,叫做穿过这个平面的磁通量,简称磁通。

WB是世界银行的缩写。

世界银行(The World Bank)是世界银行集团的简称,国际复兴开发银行的通称;也是联合国的一个专门机构。

世界银行成立于1945年,1946年6月开始营业,由国际复兴开发银行、国际开发协会、国际金融公司、多边投资担保机构和国际投资争端解决中心五个成员机构组成。

世界银行的主要目标

世界银行向发展中国家提供长期贷款和技术协助来帮助这些国家实现它们的反贫穷政策。世界银行的贷款被用在非常广泛的领域中,从对医疗和教育系统的改革到诸如堤坝、公路和国家公园等环境和基础设施的建设。除财政帮助外世界银行还在所有的经济发展方面提供顾问和技术协助。

1996年詹姆斯·沃尔芬森当任总裁以来世界银行将其重点集中在反贪污运动上。有人认为这个做法违反了世界银行协议第10节第10款中规定的“非政治性”。不过世界银行在社会经济学的名义下曾多次涉及到国家改革以至于选举的活动。

世界银行开始放弃它一直追求的经济发展而更加集中于减轻贫穷。它也开始更重视支持小型地区性的企业,它意识到干净的水、教育和可持续发展对经济发展是非常关键的,并开始在这些项目中投巨资。

作为对批评的反应世界银行采纳了许多环境和社会保护政策来保证其项目在受贷国内不造成对当地人或人群的损害。虽然如此非政府组织依然经常谴责世界银行集团的项目带来环境和社会的破坏以及未达到它们原来的目的。

百度百科-WB

1、WB

拼音缩写:WB

拼音全称:wēi bó

汉语解释:微博

缩写分类:常用词汇

2、WB

英文缩写:WB

英文全称:Work Book

中文解释:工作手册

缩写分类:常用词汇

3、WB

英文缩写:WB

英文全称:Weather Bureau

中文解释:气象局

缩写分类:天文地理、机构组织

4、WB

英文缩写:WB

英文全称:Water Box

中文解释:水箱

缩写分类:常用词汇

5、WB

英文缩写:WB

英文全称:welcome back

中文解释:欢迎你回来

缩写分类:时尚用语、常用词汇

6、WB

英文缩写:WB

英文全称:White Balance

中文解释:白平衡

缩写分类:电子电工、艺术

缩写简介:在不同的光源下,因色光成份不同(色温不同),数码相机拍摄出来的相片会偏色,因此便利用白平衡来作修正,让影像不致偏色。

WB

abbr(=World Bank)世界银行(联合国);= W/B

网络世界银行(World Bank);白平衡(White Balance);韦伯;人名缩写。

例句:

1、However, WB says the trailer will go up on satellite on Sunday, so if someone captures it and converts it, we could have it a day earlier

然而,华纳说预告片的数据将于周日送上人造卫星,所以如果有人捕获数据到并且转换格式,我们就可以早一天看到咯。

2、WB to help China transit to high income country

世界银行欲帮助中国过渡到高收入国家。

在其他领域比如相机参数中,WB即白平衡。白平衡主要控制照片的黄蓝红绿程度。WB数值越高,照片越黄,相反越蓝。在一些特定情况下会用到白平衡漂移,也就是调整红绿色调。当你发现照片偏红,则可以在wb里面往绿色方面调整。

一般情况可把相机的白平衡设为自动白平衡(AWB)。

wb有很多意思:网吧、玩吧、王八这是常用语的缩写,看用在什么地方。

WB:Warnerbros的缩写:华纳兄弟公司。

工艺单上面意思:waist band 腰头,是指腰围的尺寸。

物理中:韦伯(磁通量单位)。

韦伯:

来源于人名的,例如: 安培(A帕斯卡(Pa韦伯(Wb)等 单位符号应写在全部数值之后,并与数值间留半个数字的空隙 SI词头符号一律用正体字母,大于103者为大写字母,小于106者为小写字母 SI词头符号与单位符号间。

全血:

目的比较高渗晶-胶混合液、等渗晶体溶液和全血对失血性休克犬的血流动力学和全身氧供状态的影响方法 18只犬麻醉后气管内插管,自主呼吸,经股动脉放血至平均动脉压67kpa,维持1h然后分别以乳酸林格氏液(LR)、全血(WB)和75%氯化钠+10%羟乙基淀粉混合液(HHS)进行抗休克治疗。

世界银行:

社论指出,新加坡当局轮值主办"国际货币基金"(IMF)暨"世界银行"(WB)于9月举行的年会,是一次不同于寻常的机会 前述国际金融机构盛会代表人员具相当规模,又有高水准的专业背景,惠然莅止,无疑为新加坡声名加分。

白平衡:

相机快门(SHUTTER)一关一合,光圈(APERTURE)调大调细,白平衡(WB),对焦(FOCUS)…&hellip。"

western-blotting; 免疫印迹。

wide-bandwidth; 宽带。

wetted bulb; 湿球。

whole-blood; 全血。

以上就是关于wb是什么意思的缩写 wb的意思全部的内容,包括:wb是什么意思的缩写 wb的意思、wb实验的原理和步骤、wb是什么单位等相关内容解答,如果想了解更多相关内容,可以关注我们,你们的支持是我们更新的动力!

欢迎分享,转载请注明来源:聚客百科

原文地址: https://juke.outofmemory.cn/life/3660560.html

()
打赏 微信扫一扫 微信扫一扫 支付宝扫一扫 支付宝扫一扫
上一篇 2023-04-24
下一篇 2023-04-24

发表评论

登录后才能评论

评论列表(0条)

保存