PCR产物为什么会出现100~200bp的条带

你的目的片段长度为500bp,而你的电泳图谱显示是750bp;你对电泳图谱750bp的片段是认可的，也就是说除去目的片段500bp，还有150bp的引物及其他序列；而你的杂带大小平均恰好是150bp，也就是除去150bp的引物及其他序列，应该不含有其他的DNA序列，因此判断你的150bp的条带就是引物二聚体造成的，如果条带非常亮的话，可以考虑减少引物的加入量。

是4^100

不是4100

100个碱基对,每个碱基对有4种：A—T、

T—A、C—G、

G—C,所以是4的100次方种

注意：这里的DNA是双链,像梯子一样,所以A—T、

T—A不一样

电泳时marker选择方法：

如果是核酸marker比较简单吧,就是看marker条带的大小和你的目标条带的关系,尽量选择目标条带接近分子量的marker,或是在目标分子量附近条带较多的marker

另外就是,如果目标分子量很小,凝胶通常选择的浓度较大,就不能用分子量太大的marker,例如,只检测200bp的条带,那么用分子量最大到1000,或者500的marker就比较合适

如果分子量很大,例如在几k,就可能会选择向lamda HindIII这样最大到23K的marker否则凝胶浓度不合适,marker条带分不开,影响对你目标分子分子量的判断

以前我们在实验室用得最多的是2000,和15000的marker,能覆盖大部分分子量的检测

100bp DNA ladder是由10条PCR扩增片段混合而成的。

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