PCR(聚合酶链反应):类似于DNA的天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。
基本原理:PCR技术的基本原理类似于DNA的天然复制过程,其特异性主要依赖于和靶序列两端互补的寡核苷酸引物,它由变性——复性——延伸三个基本反应步骤构成。
所需材料:
模板DNA
正二价镁离子
引物
反应缓冲液
TAQDNA聚合酶
拓展回答:
反应特点
特异性强。
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合。
②碱基配对原则。
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性。
④靶基因的特异性与保守性。
灵敏度高。
PCR产物的生成量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12)量级的起始待测模板扩增到微克(μg=-6)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在细菌学中最小检出率为3个细菌。
简便、快速。
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
纯度要求低。
不需要分离病毒或细菌及培养细胞,DNA 粗制品及RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活组织等DNA扩增检测。
聚合酶链式反应简称PCR(英文全称:Polymerase Chain Reaction), 聚合酶链式反应
具体内容点击: 聚合酶链式反应,简称PCR。聚合酶链式反应,其英文Polymease Chain Reaction(PCR)是体外酶促合成特异DNA片段的一种方法,由高温变性、低温退火及适温延伸等几步反应组成一个周期,循环进行,使目的DNA得以迅速扩增,具有特异性强、灵敏度高、操作简便、省时等特点。它不仅可用于基因分离、克隆和核酸序列分析等基础研究,还可用于疾病病的诊断或任何有DNA,RNA的地方.聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,简称PCR)又称无细胞分子克隆或特异性DNA序列体外引物定向酶促扩增技术
聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction ,PCR)是80年代中期发展起来的体外核酸扩增技术。
上面这句是百度来的
简单来说,这种技术,是一种 DNA片段扩增技术
我们有时候需要检测某种目的 DNA片段是否存在。
但是该片段的量比较少,如果是直接检测,则不容易检测出来。
这个时候就需要采用 pcr 技术,在体外,比如 EP管内, 对这个DNA片段进行扩增。
打个比方,就好比是一个喇叭,把一个很小的声音放大,我们就很容易听到一样。
通过PCR扩增之后,我们要检测的那个DNA片段 的数目 被 增大 几百万倍,这个时候我们检测就很容易了。
PCR扩增是指数级的
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