计算ED50的方法:
用抗炎试验(耳肿胀)来确定的。首先,每个剂量组用单因素方差分析的,得出有显差的最低剂量,然后计算每组每只小鼠耳肿胀抑制率,以有显差的最低剂量组的耳肿胀抑制率的均数为标准。比较各组中抑制率大于此标准的为有效,由此得出每组有效数量,从而求出ED50。
计算EC50方法:
1出于计算IC50的需要,一般所取的剂量都呈倍数关系,如果将效应对剂量作一条曲线的话,可见随剂量增加,效应也增加,到一定程度后进入平台期,这就是剂量-效应曲线(dose-response curve);
既然剂量是倍比增加,那么它们的对数是等距的,若将剂量取对数,则曲线变为S型,两端比较平坦,剂量变化引起的效应变化不大,而中间部分几乎呈直线,剂量的轻微变化即可引致效应的明显改变,选择EC50的原因即在于此,这一点的数值比较灵敏和精确,常用于代表某药的效应强度。
2所有软件或计算公式求取EC50的原理都离不开上述的几种曲线,加深对上述原理的理解,将极大的有助于运用各种方法解决问题。
或者按Origin的方法来做,则是按S型曲线来拟合的,那么得出的数值又不同了(比SPSS做的低些),尽管这些都是计算EC50的方法,都有理有据。SPSS(不做剂量对数变换时)和Origin的方法,不用做复杂的变换,变换越多,拟合的曲线似乎越偏离实际情况,
3改良寇氏法不适合的实验,《医学统计学》一书,上有加权直线回归法的原理和计算方法介绍,
半数致死量(median lethal dose, LD50) 表示在规定时间内,通过指定感染途径,使一定体重或年龄的某种动物半数死亡所需最小细菌数或毒素量。 在毒理学中,半数致死量,简称LD50(即Lethal Dose, 50%),是描述有毒物质或辐射的毒性的常用指标。按照医学主题词表(MeSH)的定义,LD50是指“能杀死一半试验总体之有害物质、有毒物质或游离辐射的剂量”。这测试最先由JW Trevan于1927年发明。
半数有效量: 在量反应中是指能引起50%最大反应强度的药物剂量;在质反应中只引起50%实验动物出现阳性反应的药物剂量。半数致死量越大,半数有效量越小,则表明药物的安全度越高。因而常用治疗指数(LD50/ED50)作为药物安全度的指标。其比值越大,则安全度越高;其比值越小,则安全度也就越小。这个比值常称为治疗指数。
治疗指数:英文名称:therapeutic index。 通常将半数致死量(LD50)和半数有效量(ED50)的比值称为治疗指数,用以表示药物的安全性。 治疗指数大的药物相对治疗指数小的药物安全。但以治疗指数来评价药物的安全性,并不完全可靠。为此有人用1%致死量(LD1)与99%有效量(ED99)的比值或5%致死量(LD5)与95%有效量(ED95)之间的距离来衡量药物的安全性。
计算方法
IC50和EC50的计算一般需要测定5个以上的点,再通过曲线拟合得到函数计算而得,或者假设IC50(EC50)附近的点连成直线计算而得等,但这都存在较大的误差。因为拟合的函数曲线并不能保证都通过所测定的点,其次IC50(EC50)附近的点并不都连成直线,所以计算误差较大。IC50(EC50)计算软件解决了以上问题。本软件输入可以为多组试验数据,软件将自动取最靠近IC50(EC50)处的三个点进行二次曲线拟合,所建立的函数能完全通过IC50(EC50)附近的3个点,决定系数R2=100,并自动生成曲线图、曲线方程和IC50(EC50)值。支持曲线图的复制、粘贴及图上上文字的编辑。在保证试验数据精度的前提下可以确保在IC50(EC50)周围的曲线的高精度,由此算得的IC50(EC50)可以保证是高精度的,使用效果很好。
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