大巴车晚上10点后可以上高速，但是凌晨两点到五点之间是不行的。
大巴车属于中型或者大型的客运汽车，大巴车上高速要注意的是，有一个时间段是禁止行驶的。按照规定，大巴车在凌晨两点到五点是禁止上高速行驶的。但是其他车型是不受这个时间影响的。
大巴车高速凌晨两点到五点是禁止通行的，这个主要是因为这个时间段已经到了深夜，对于大巴车驾驶员来说，夜间行车肯定会有疲倦的，为了防止疲劳驾驶引起的交通事故，所以在这个时间段高速是禁止大巴车通行的。
大巴车上高速要注意的事情有哪些？
1、关注路况和天气，尤其是一些特殊的季节，比如冬季，容易有雾霾，这个情况下发生事故的几率是比较大的这个要提前通过手机软件等关注的。
2、大巴车驾驶员一定要注意休息，疲劳驾驶一定要避免的。高速上，这个车速还是很快的，再加上整个路面是封闭的，所以车速通常是比较快的。这样的路况，还有操作上的单调，是很容易让大巴车驾驶员分心的，也会让驾驶员感到疲劳。建议大巴车驾驶员连续驾驶两个小时就要到服务区休息一下。
【法律分析】大巴车凌晨2点至5点在高速上必须休息。根据《道路旅客运输企业安全管理规范》：长途客运车辆凌晨2时至5时停止运行或实行接驳运输，凌晨2点后禁止长途客车从收费站口上高速，对此时间段内正在高速公路上行驶的长途客车就近引导到服务区或客运站停车休息。从事线路固定的机场、高铁快线以及短途驳载且单程运营里程在100公里以内的客运车辆，在确保安全的前提下，不受凌晨2时至5时通行限制。
【法律依据】
《道路旅客运输企业安全管理规范》长途客运车辆凌晨2时至5时停止运行或实行接驳运输，凌晨2点后禁止长途客车从收费站口上高速，对此时间段内正在高速公路上行驶的长途客车就近引导到服务区或客运站停车休息。从事线路固定的机场、高铁快线以及短途驳载且单程运营里程在100公里以内的客运车辆，在确保安全的前提下，不受凌晨2时至5时通行限制。
【法律分析】高速公路上大巴车，在凌晨两点之五点禁止在高速路通行。高速公路属于高等级公路。中国交通部《公路工程技术标准》规定，高速公路指：能适应年平均昼夜小客车交通量为25000辆以上、专供汽车分道高速行驶、并全部控制出入的公路。
【法律依据】
《中华人民共和国公路工程技术标准》 第一条 大巴车夜间行驶：1、必须按规定随车配备两名或以上具备资质的、经考核合格的驾驶员；2、大巴车驾驶员在夜间2时至5时之间运营时，必须在公司规定的休息点停车换人；3、在休息点待班的驾驶员要保证有充分休息的时间，并保证在每天夜班接班前有不低于6小时的强制卧床休息时间；每班车执行驾驶员落地换人时；下车休息的随车驾驶员不得低于1人，另一名未下车的随车驾驶员不得立即驾驶大巴车，必须由新换上车的驾驶员驾驶；4、大巴车在交接班期间，要提前做好旅客安全告知和其他相关服务工作，确保旅客人身和财产安全；下车休息的驾驶员必须在交班后1小时内强制卧床休息，与第二次轮换上车的的间隔时间不得低于8小时；5、夜间22时至次日凌晨6时之间，驾驶员连续驾驶时间不得超过2小时，每次停车休息时间不得少于25分钟；夜间行车速度必须保证在日间限速的80%以内；高速公路最高速度不得超过80公里/小时。
