酵母菌生长的最适宜温度在20℃～30℃之间，能在pH值为3～7.5的范围内生长，在氧气充足的环境中主要以出芽

（1）第五步中“每天随机抽时间取样计数”应改为“每天同一时间（定时）取样”，这样每天取样时间间隔相同，是所得的实验数据更加准确，画出的变化曲线更加具有参考价值．

（2）①振荡摇匀试管，取1mL培养液并适当稀释．

②在对酵母菌数量进行抽样检测时，首先振荡摇匀试管，取1mL培养液并适当稀释，然后将盖玻片放在计数室上，用吸管吸取稀释后的培养液．滴于其边缘，让培养液自行渗入，多余培养液用滤纸（吸水纸）吸去，制作好临时装片．

③在显微镜下观察计数时，由于死的酵母菌细胞膜失去选择透过性，因此被染成蓝色，而活的酵母菌不会被染色，因此计数时只记不被染成蓝色的酵母菌．

（3）如所使用的血球计数板有16个中方格，每l中方格中有25个小方格，每1个小方格容积为0.1mm3（1mL=1000mm3）．已知每个小方格平均有10个酵母菌，那1mL培养液中酵母细胞个数=平均每个小方格的酵母菌数÷每1个小方格容积×稀释倍数=平均每个小方格的酵母菌数×400×104×稀释倍数=10×400×104×1=4×107．

（4）由于酵母菌在发酵过程中产生二氧化碳，因此培养液的PH会不断下降，因此根据PH值变化可以确定表中样品的取样先后次序为4、1、3、2．对酵母菌而言，10毫升该培养液的环境负荷量为1.21×107个．若第5次均匀取样时，样品中的酵母菌数量为760个/立方毫米，产生这一结果的原因是培养液中的营养物质不断被消耗，部分酵母菌因营养缺乏而死亡并解体．

故答案为：

（1）第五步中应每天同一时间（定时）取样

（2）①振荡摇匀           ②盖玻片                用滤纸（吸水纸）吸去

（3）4×107

（4）4、1、3、2      1.21×10 7

培养液中的营养物质不断被消耗，部分酵母菌因营养缺乏而死亡并解体

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