我做电泳时不小心TEMED加多了一倍。

不是，TEMED和AP不会影响条带。它们只是胶凝固的催化剂。不信你做两块胶，一块用5ulTEMED，一块用50ulTEMED 试试，保证对条带没有任何影响。多加了TEMED，只会让胶凝固得更快。条带消失的原因很多，可能是蛋白降解，或者染色不佳，我跑电泳多年，从来没有见过TEMED和AP可以让条带消失的。

AP为催化剂，TEMED为加速剂，TEMED可以加速AP释放游离O原子（自由基），催化聚丙烯酰胺单体聚合成网状结构。但是两者的量一定适宜，否则会有烧胶或带变形的可能。

在注入分离胶后上面需要加入一层水，这是因为空气中的氧分子会氧化AP使其活性减弱。加入这层水后可以让反应快速进行，同时也保证了分离胶上层面的平整。

因此，我们最后加，防止催化活性的减弱。当然操作快和熟练的这个影响也没那么大。胶能不能制好是个关键，这个受外界环境的影响很大。祝福你跑个好胶。

根据凝胶的比例不同,TEMED的量也是不同的

TEMED可以加快凝胶的凝固速度,用量不一定不变,可以根据需要增加用量,或者在效果不好的时候加大用量两微升到四微升都可以

这是我做实验时的一点经验,不知道适不适合

“TEMED是增速剂,加少了也不会不凝固关键是AP的使用,AP只是起到引发反应的作用,加入极少量即可,一般是几个微升,千万不要加多,否则凝固速度过快,来不及灌胶就会凝固,即使能来得及灌胶,制出凝胶也是不均匀的而且AP要在最后加入,如果配胶之后无法及时灌制,就不要加AP了,到灌胶之前再加入AP混匀”

SDS 破坏蛋白的二硫键使蛋白变性，改变蛋白结构。同时给蛋白附上大量的负电荷。

SDS -page 预制胶，是在塑料胶板里的预先做好的一种胶。就是买来可以直接用的

AB 你是指A、B 液么。一般A液里是丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺、B液一般是SDS和缓冲液，

AP 10%过硫酸铵 催化剂，催化单丙和双丙聚合成聚丙烯酰胺。TEMED 四甲基乙二胺

催凝剂，加速AP 催化作用。

拼音手打伤不起啊~~

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