国际记忆大师刘纲在浙江卫视播放的讲座的记忆方法到底好不好啊

他把中文和英语搞得乱七八糟的。某些省级电视台近来一直在播一个出售记忆英语单词的软件广告，一个号称“国际记忆大师”名叫“刘×”的男人在讲台上鼓吹他的记忆方法。还让一些小学生当场表演记忆效果，神乎其神。广告上所吹嘘的单词记忆方法其实一点也不新鲜。以节目中举的几个单词为例：chill （寒冷的）、bloom（花）、dance（跳舞）。chill （寒冷的）这个单词是这样记的：chi读作“吃”，ll像两根冰棍，连起来就是“吃两根冰棍”，吃两根冰棍感觉很寒冷，于是，“吃两根冰棍”—— chill （寒冷的）。bloom（花）是这样记的：bloo看上去像阿拉伯数字6100，而字母m是“妈妈”的声母，这个单词就可以想像成“在母亲节的时候送6100朵花给妈妈”，于是就记住了bloom（花）。dance（跳舞）这个单词的记忆方法就更可笑了：dan的谐音是“蛋”，ce看成是“厕”的拼音，于是联想：“蛋在厕所里跳舞”—— dance。看来每个单词都要编成一个荒诞离奇的“故事”。以上方法乍看起来似乎很神奇有效，其实很荒唐。或许有人认为用这种联想方法记得会很牢，其实不然。仍以上述单词为例。假如我在记忆chill的时候一时搞不清是几根冰棍怎么办呢？比如说我记成三根冰棍，那就会拼成chilll，若记成一根冰棍，就是chil，为什么一定能记得是两根呢？再或者，我要是记不住是“吃”了两根冰棍，而记成“买”两根冰棍怎么办呢？岂不是要拼成maill？再或者，即使是记牢了“吃两根冰棍”，谁能保证可以据此联想到chill这一拼法呢？须知，“冰棍”不见得就一定能使人想到ll这一字母组合啊！（qq和pp看起来也像是两根冰棍呢！而且更形象！）还有，“吃两根冰棍”在一般人大脑中激活的联想首先应该是舒服、惬意之类，怎么可能想到“寒冷”这一词义呢？顶多是联想到“凉爽”，与“寒冷”还是有相当的差距的。再看bloom（花），当然在看到这个单词的时候，bloo看上去的确有点像数字6100，但当我们在大脑中回忆这个词的时候，怎么保证能想到是这么个数字呢？会不会记为6200或610呢？也可能是其他数字，那岂不是很糟糕吗？6100朵花送给妈妈，就是bloom，万一错记为送给爸爸又该怎么办？那非得拼为bloob不可！广告上说，从初中到大学的所有单词都设计成这种记忆方法，配以动画，记忆起来很方便，并号称27个小时可以记住1800个英语单词。我想说的是，1800个单词，就要有类似以上联想方式的1800个联想的“故事”相搭配，而谁能保证这1800个“故事”在大脑中不记混，不“串台”呢？记得越多越容易混，记得越多头脑越不堪重负。这种记忆方式另一个弊端是，它完全割裂了单词拼写与发音规律的联系。以dance（跳舞）为例，根据其发音规律是很容易记忆的，何必多此一举搞出“鸡蛋在厕所里跳舞”的闹剧呢？真担心初学英语的孩子根据这一联想把dance一词读成“蛋厕”！无论是“在厕所里跳舞”还是“6100朵花”，还是“吃两根冰棍”，都和发音没什么关系。我们知道，英语是一种拼音文字，它的拼写基本上代表了读音，两者合在一块记，实在是事半功倍，又何必“在厕所里跳舞”，把人搞晕呢？作为英语学习者，对一起发音不规则的单词，自创一些联想记忆法来帮助记忆，本身无可厚非，但把这种方法推而广之，应用到所有的单词上，并且以此来骗人钱财，那就是不道德了。

染色质免疫沉淀后测序( ChIP seq )是一种针对DNA结合蛋白、组蛋白修饰或核小体的全基因组分析技术。由于二代测序技术的巨大进步，ChIP-seq比其最初版本ChIP-chip具有更高的分辨率、更低的噪声和更大的覆盖范围。随着测序成本的降低，ChIP- seq已成为研究基因调控和表观遗传机制不可或缺的工具。

原理：甲醛处理细胞使目标蛋白与DNA交联，通过超声波将交联后的染色质打断成小片段，一般在200-600bp范围内。再利用抗原抗体的特异性识别反应，将与目的蛋白相结合的DNA片段沉淀下来。最后，去交联并对纯化后DNA进行PCR扩增，高通量测序，最后与已有基因组序列进行比对，以确定    DNA与蛋白质结合的序列。

问题分析：

1甲醛交联对后续结果分析的影响？

自从Orlando V等人首次发明了ChIP技术，十几年后核心步骤仍无大变化。然而，ChIP-seq技术实际存在一定 的缺陷，例如甲醛交联 。甲醛虽然是一种高度渗透的交联剂，但由于其反应活性仅限于胺，因此其交联效率较低；对哺乳动物细胞而言，其最大交联效率仅为1%。因此甲醛交联细胞所需的起始量很大，也因此该技术也很难适用于微量细胞及单细胞样本。牛津大学出版社发表的文章In vivo formaldehyde cross-linking: it is time for black box analysis指出，某些蛋白质如：阻遏蛋白，NF-κB等无法通过甲醛交联到DNA上，研究表明；在DNA上的停留时间短于5秒的蛋白质无法用甲醛交联。其次，甲醛会导致许多其它无关蛋白质交联到DNA上，影响后续分析数据。有报道称，甲醛交联会触发DNA损伤应答机制，从而改变染色体组分，进而使ChIP结果产生偏向性。除此之外，由于交联反应在加热和低PH的情况下会发生逆转，因此DNA蛋与白质的交联复合物的稳定性也是一个值得关注的问题。因此，甲醛究竟在多大程度上能反应细胞内蛋白质的分布仍不能确定。

根据有无甲醛交联步骤可以把CHIP技术划分为两种类型，一类是存在甲醛交联的ChIP，即X-ChIP（cross-linking and mechanical shearing ChIP）；另一类是无交联存在的ChIP，即N-ChIP（native-ChIP）；相较于X-ChIP，N-ChIP技术有一系列的优点，包括：高分辨率（MNase的使用使得染色体的片段化可以小至核小体）、避免了甲醛交联带来的非特异性蛋白在DNA上的富集、避免了甲醛交联对抗原表位的遮盖、步骤的减少降低了样品的损失等。然而，由于使用了MNase，N-ChIP只适用于研究组蛋白修饰，大部分情况下不能用于转录因子的研究。

2 超声波打断和酶断裂方法的比较？

酶类：  最常用的酶类如 MNase ，即：微球菌核酸酶，是一种能降解核小体连接区的DNA序列的核酸酶，最初从金**葡萄球菌中分离出来。MNase消化染色质可以释放出一个个独立的核小体。

MNase酶解法具有一定的局限性，首先，MNase对于偏向于切割A/T碱基位点，导致核小体在A/T富集区域的表达量低于真实情况；其次，MNase不能在核小体边界精确切割，这导致在确定染色质的开放位置与真实情况存在差异；而且，MNase偏向于消化脆性核小体。在不同物种的实验证据表明，脆性核小体占据了基因启动子和转录终止位点，而脆性核小体只在MNase浓度较低且消化时间较短的情况下才能被检测出来，因此很难将脆弱核小体量化到稳定核小体的相对丰度。

超声打断则不如酶裂解法温和，而且由于打断的不均匀性，导致测序结果背景噪音高，影响后续数据分析。由于文章篇幅限制，在此不多赘述。

那么究竟选择酶解还是超声打断，需要视 情况 而定。可参考以下建议：

如果所研究的蛋白质高丰度表达且与DNA结合紧密如组蛋白，那么样本无需需交联，这时可使用酶解法。

如果所研究的蛋白质表达丰度较低或与DNA结合不紧密如转录因子等，往往需要用交联试剂将样本进行固定，稳定蛋白质和DNA的形态，这时最好选用超声法进行断裂。

拓展：

适用于微量细胞水平的ChIP技术及其原理

1）CUT-Tag技术：

CUT-Tag可同时用于研究转录因子结合位点以及DNA的开放性。可在一天之内完成从细胞到建库完成的所有步骤，且具有高分辨率，低噪音等特点。起始细胞用量可低至50个。[1]

原理：利用抗原抗体特异性反应，加入特异性抗体与染色体上目标蛋白结合，加入二抗与该抗体结合以募集更多的pA-Tn5转座酶复合物至目标蛋白与DNA序列的结合位点上，转座酶复合物切割该染色质开放位点，并在切割后的DNA片段两端加入接头，文库构建完成，可直接进行后续测序，与已有基因组序列比对，即可知道目标蛋白与DNA的结合位点。

2）ChIL-seq：

ChIL（chromatin integration labelling），即染色质集成标签技术，可同时用于研究转录因子结合位点以及DNA的开放性，起始细胞用量为100-1000个细胞。ChIL-seq 避免了传统ChIP-seq技术中由于抗体沉淀所带来的回收率低的缺陷，尤其适用于贴壁细胞。对于活跃的组蛋白标记如H3K4me3 ，H3K27ac，起始细胞用量甚至可降低至单细胞水平。[2]

原理：在96孔板中加入细胞，经固定，染色后加入一抗与目标蛋白结合，随后加入ChIL探针（由二抗和ChIL DNA组成），探针中的ChIL DNA经Tn5转座酶整合到目标蛋白所在基因组DNA附近，随后T7 RNA 聚合酶经ChIL DNA中的启动子启动转录，以此处基因组DNA为模板合成RNA，经DNase I消化和裂解释放RNA，以纯化的RNA建库测序。

3．Drop-ChIP:

Drop-ChIP:使用了特定的微流控装置，分辨率可达到单细胞水平。该技术不仅可以在单细胞水平研究转录因子结合位点及组蛋白修饰，还可以从细胞特异性角度研究不同细胞间染色质的变异程度。我们认为，整合单细胞染色质和单细胞表达数据，可以使调控元件与靶基因更精确地耦合，并更深入地了解它们的功能动力学和关系。[3]

原理：首先，将待研究的细胞与裂解液，MNase混合进行染色质消化，另外设计一个包含很多种不同接头的液滴，在微流控装置上反应，使得每一个细胞液滴与一种接头液滴混合，同时与含有DNA连接酶的buffer液滴混合。这个过程中，接头序列自动连接到裂解的染色质片段两端，进而进行细胞裂解，使用特异性抗体对目标蛋白进行沉淀，对富集后的DNA进行测序。与已有基因组序列比对即可知道目标蛋白作用位点。

[1] 1: Kaya-OkurHS, Wu SJ, Codomo CA, Pledger ES, Bryson TD, Henikoff JG, Ahmad K,Henikoff SCUT&Tag for efficient epigenomic profiling of small samples and singlecells Nat Commun 2019 Apr 29;10(1):1930

[2] Harada A,Maehara K, Handa T, Arimura Y, Nogami J, Hayashi-Takanaka Y, Shirahige K,Kurumizaka H, Kimura H, Ohkawa Y A chromatin integration labelling method enablesepigenomic profiling with lower input Nat Cell Biol 2019 Feb;21(2):287-296

[3] Rotem A, RamO, Shoresh N, Sperling RA, Goren A, Weitz DA, Bernstein BE Single-cellChIP-seq reveals cell subpopulations defined by chromatin state Nat Biotechnol 2015Nov;33(11):1165-72

姓名：安七炫

英文名：AN CHIL HYUN

生日1979 10 10

血型B型

出生地点：Kyug-Buk City ,Yae-Chun Ave

身高：178CM（有消息说已经182CM）

体重：65KG左右

兴趣：吉他 鼓

家庭情况：一个哥哥 一个姐姐

信仰宗教：没有

在H．O．T中身份：主唱

曾经就读学校：Dong Guk大学

鞋码：28码．

喜欢女孩类型：不爱说话 聪明 长发 娇小 可爱 大眼睛

喜欢的歌手：Duex,Yoo Young Jin,Babyface

喜欢的音乐类型：Rock R&B Hip Hop

喜欢的演员：Chirstopher Ranforth

喜欢的颜色：黑色

喜欢的花：木槿（韩国国花）

喜欢的季节：冬天

喜欢的运动：橄榄球和篮球

喜欢的科目：韩国历史和世界历史

在H．O．T中和谁比较亲近HEE JUNE和TONY

KANG TA的目标：成为韩国NO．1的歌手和作曲人

睡觉的习惯：整个晚上保持一样的姿势

每天早上做的第一件事情：去浴室

每天晚上做的最后一件事情：从1数到100

如何减压：睡和吃

讨厌的事物：胡罗卜

讨厌的事情：别人说他没用

最讨厌的人：自私的人

最讨厌哪中歌迷的来信：用自己的血来写信的女孩．

安七炫 资料简介：

“怎么长得这么漂亮？”“真像是富家少爷。”小时候，背着小书包上幼儿园时，见到我的人都这么说。但是，说实话我不喜欢这些评价。不喜欢人们说我长得漂亮，把一个男孩说成漂亮，你会高兴吗？还有我并不是富家少爷。HOT活动初期，传闻里说，我家是个大财主。我极力说明也无用，FANS根本不相信我。看了这本书之后，再也不会有人说我是富家少爷了吧？

我出生的地方叫汉城市圣水洞。我是父亲安根植（50岁）和母亲梁英姬（49岁）的二男一女中的老三。我出生的地方并不是医院，而是单间小屋，因为当时父母刚从庆北搬到了汉城，生活还没有着落，住的房也是租的。“你知道是谁把你养大的吗？是我把你养大的。”经常跟我叫劲的就是比我长四岁的姐姐。听说为了看好我，姐姐经常一个人呆在家里，而窗外有很多小朋友们在又说又笑地玩闹着。可怜的姐姐把童年无私地奉献给了我。父母工作忙，无暇照顾我，因为当时父母开了一家服装店。“安七炫”，虽然“Kang Ta ”的名字已经相当耳熟，但始终不如父母叫的这个名字亲切。当我说我叫“安七炫’时，别人都会觉得名字很怪并免不了议论一番。 其实这个名字含有像七星火一样，雄雄燃烧的意思，还有就是事事都像幸运数字7一样幸运。起这个名字的经过也很有意思。“这小鬼，长得蛮漂亮嘛，给你起一个名字吧。”邻居的一位善于起名的老大爷见了我之后，就给我起了“七炫”这个名字。但那时候，爸爸为了给我起名字，已去了爷爷家。从乡下回来的爸爸带来了“希星”这个名字。“希”字是从姐姐、哥哥名字上取下来的。“希星”和“七炫”之间的竞争最后以“七炫”的胜利而告终。因为爸爸不在的几天功夫，家里人叫惯了“七炫”这个名字。相比之下，“希星”则陌生了很多。所以家族男孩子中唯有我的名字里没有“希”字。现在父母还经常说起了个好名字。

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