完全培养基根据添加血清量的多少,可分为细胞生长培养基和细胞维持培养基,用于不同细胞和不同研究。 细胞生长培养基(液)是用以维持细胞生长增殖之用,含血清比例较大。生长培养液是培养细胞工作中最主要的培养用液。其组成为:基础培养基80%~90%,血清(多用小牛血清) 10%~20%,抗生素(多用青霉素100U/mL和链霉素100μg/mL)。
这是适用于一般细胞的培养液组成。为培养特定细胞,还要选择适应性培养基,可能尚需添加基本培养基中缺少或该细胞需要的成分。 这是为维持细胞缓慢生长或不死的培养液,血清含量甚少。一般细胞因缺少生长因子不能增殖,生长缓慢;但发生转化或癌细胞因自身有产生促生长增殖因子的能力,虽在血清缺少情况下仍能生长;因此维持液可用于选择发生恶性转化的细胞。其组成为:基本培养基95%,血清2%~5%,抗生素(多用青霉素100U/mL和链霉素100μg/mL)。
此处需注意,如培养正常细胞完全不加血清,可维持细胞不死,但时间过长细胞难免退化。
固体培养基可以分为两类:一类是用天然的固体状物质制成的,如用马铃薯块、麸皮、米糠、豆饼粉、花生饼粉制成的培养基,酒精厂、酿造厂等常用这种培养基;另一类是在液体中添加凝固剂而制成的,如实验室中常用的琼脂固体斜面和固体平板培养基。这种培养基广泛用于微生物的分离、鉴定、保藏、计数及菌落特征的观察等。
微生物培养基是供微生物、植物组织和动物组织生长和维持用的人工配制的养料,一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐(包括微量元素)以及维生素和水等。不同培养基可根据实际需要,添加一些自身无法合成的化合物,即生长因子。有些微生物,如自养型微生物,不需要碳源,所以上述物质只具有一般性。微生物培养基的分类如下:
1、培养基按其所含成分,可分为合成培养基、天然培养基和半合成培养基三类。
2、按照培养基的物理状态分,培养基按其物理状态可分为固体培养基、液体培养基和半固体培养基三类。
3、按照微生物的种类分,培养基按微生物的种类可分为细菌培养基、放线菌培养基、酵母菌培养基和霉菌培养基等四类。
4、按照培养基用途分,培养基按其特殊用途可分为加富培养基、选择性培养基和鉴别培养基。
培养基的种类繁多。中海生物技术可将培养基分成以下一些类型:
(一)根据所培养微生物的种类作分类根据微生物的种类可分为:细菌、放线菌、酵母菌和霉菌培养基。常用的异养型细菌培养基为牛肉膏蛋白胨培养基,常用的自养型细菌培养基是无机的合成培养基,常用的放线菌培养基为高氏一号合成培养基,常用的酵母菌培养基为麦芽汁培养基,常用的霉菌培养基为察氏合成培养基。
(二)根据对培养基成分的了解程度作分类
天然培养基指一类利用动、植物或微生物体包括用其提取物制成的培养基,这是一类营养成分既复杂又丰富、难以说出其确切化学组成的培养基。例如牛肉膏蛋白胨培养基。天然培养基的优点是营养丰富、种类多样、配制方便、价格低廉;缺点是化学成分不清楚、不稳定。因此,这类培养基只适用于一般实验室中的菌种培养、发酵工业中生产菌种的培养和某些发酵产物的生产等。常见的天然培养基成分有:麦芽汁、肉浸汁、鱼粉、麸皮、玉米粉、花生饼粉、玉米浆及马铃薯等。实验室中常用牛肉膏、蛋白胨及酵母膏等。
合成培养基又称组合培养基或综合培养基,是一类按微生物的营养要求精确设计后用多种高纯化学试剂配制成的培养基。例如高氏一号培养基、察氏培养基等。合成培养基的优点是成分精确、重演性高;缺点是价格较贵,配制麻烦,且微生物生长比较一般。因此,通常仅适用于营养、代谢、生理、生化、遗传、育种、菌种鉴定或生物测定等对定量要求较高的研究工作中。
半合成培养基又称半组合培养基,指一类主要以化学试剂配制,同时还加有某种或某些天然成分的培养基。例如培养真菌的马铃薯蔗糖培养基等。严格地讲,凡含有未经特殊处理的琼脂的任何合成培养基,实质上都是一种半合成培养基。半合成培养基特点是配制方便,成本低,微生物生长良好。发酵生产和实验室中应用的大多数培养基都属于半合成培养基。
(三)根据培养基的物理状态作分类
1液体培养基呈液体状态的培养基为液体培养基。它广泛用于微生物学实验和生产,在实验室中主要用于微生物的生理、代谢研究和获取大量菌体,在发酵生产中绝大多数发酵都采用液体培养基。
2固体培养基
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