单链的核酸外切酶包括大肠杆菌核酸外切酶Ⅰ(exoⅠ)和核酸外切酶Ⅶ(exoⅦ)。核酸外切酶Ⅶ(exoⅦ)能够从5′-末端或3′-末端呈单链状态的DNA分子上降解DNA,产生出寡核苷酸短片段,而且是唯一不需要Mg2+离子的活性酶,是一种耐受性很强的核酸酶。核酸外切酶Ⅶ(exoⅦ)可以用来测定基因组DNA中一些特殊的间隔序列和编码序列的位置。它只切割末端有单链突出的DNA分子。
双链的核酸外切酶包括大肠杆菌核酸外切酶Ⅲ(exoⅢ)、λ噬菌体核酸外切酶(λexo)以及T7噬菌体基因6核酸外切酶等。大肠杆菌核酸外切酶Ⅲ(exo Ⅲ)具有多种催化功能,可以降解双链DNA分子中的许多类型的磷酸二酯键。其中主要的催化活性是催化双链DNA按3′→5′的方向从3′-OH末端释放5′-单核苷酸。大肠杆菌核酸外切酶Ⅲ(exoⅢ)通过其3′→5′外切酶活性使双链DNA分子产生出单链区,经过这种修饰的DNA再配合使用Klenow酶,同时加进带放射性同位素的核苷酸,便可以制备特异性的放射性探针。
核酸外切酶 就是将核酸序列3'游离端或者5'游离端逐一水解成减少一个核苷酸长度的核酸链和游离的核苷酸x0d区别就是水解的起点端不一样x0d3'→5'核酸外切酶就是从核酸的3'游离羟基端逐一水解核酸链x0d5'→3'是从5'游离磷酸基团端逐一水解核苷酸链x0d从反应的角度看 区别只有反应的方向不一样x0d作用方式就是磷酸二酯键的水解作用x0d一般的是水解出3'游离羟基和5'游离磷酸基团x0d具体细节的反应机理作用方式 参见有机化学的亲和取代吧 水作为亲核试剂对5'侧的磷原子进行亲和加成 形成不稳定中间体后 3'侧的羟基发生消除反应 和一般的酯类水解类似 不过是在酶的催化作用下完成的一般的水解酶中有Ser或者Tyr等含有羟基的活性位点 可以在代替水进行亲和进攻 常见的类似的磷酸酯键的水解还有 氯解磷定或碘解磷定对未老化的有机磷农药中毒的乙酰胆碱酯酶的解毒过程……
核酸外切酶 就是将核酸序列3'游离端或者5'游离端逐一水解成减少一个核苷酸长度的核酸链和游离的核苷酸
区别就是水解的起点端不一样
3'→5'核酸外切酶就是从核酸的3'游离羟基端逐一水解核酸链
5'→3'是从5'游离磷酸基团端逐一水解核苷酸链
从反应的角度看 区别只有反应的方向不一样
作用方式就是磷酸二酯键的水解作用
一般的是水解出3'游离羟基和5'游离磷酸基团
具体细节的反应机理作用方式 参见有机化学的亲和取代吧 水作为亲核试剂对5'侧的磷原子进行亲和加成 形成不稳定中间体后 3'侧的羟基发生消除反应 和一般的酯类水解类似 不过是在酶的催化作用下完成的一般的水解酶中有Ser或者Tyr等含有羟基的活性位点 可以在代替水进行亲和进攻 常见的类似的磷酸酯键的水解还有 氯解磷定或碘解磷定对未老化的有机磷农药中毒的乙酰胆碱酯酶的解毒过程……
Taq DNA聚合酶是一种耐热的依赖于DNA的DNA聚合酶,它最初是从极度嗜热的栖热水生菌Thermus aquaticus中纯化而来的,现在已经以基因工程方式生产。Taq聚合酶具有5‘-3’聚合酶活性和3‘-5’外切酶活性,需要Mg2+作辅助因子。对于DNA的聚合反应而言,该酶的具体作用温度取决于靶序列,最适温度为75-80℃。摘自:陈宏,基因工程原理与应用[J],中国农业,2003第28页。
两者同属核酸酶,只是切割核酸的方式不一样而已
凡能从多核苷酸链的末端开始水解核酸的酶称为核酸外切酶,凡能从多核苷酸链中间开始水解核酸的酶称为核酸内切酶
而能识别特定的核苷酸顺序,并从特定位点水解核酸的内切酶称为限制性核酸内切酶(限制酶)
(1)该四十九肽是由49个氨基酸脱水缩合形成的,其水解后会得到49个氨基酸.
(2)短肽A、B、C的形成过程中共去掉3个苯丙氨酸(C9H11NO2),这需要断裂5个肽键,消耗5个水分子,该过程中氧原子数减数2×3-5=1个.
(3)由以上分析可知,该四十九肽只有第22、23、49号位为赖氨酸,而苯丙氨酸存在于第17、31、32号位上.
(4)假设一分子多肽由X个氨基酸组成,则505:415=100X:[100X-18(X-1)],解得X=101;该多肽中只有半胱氨酸含有S,则该多肽中含有51个半胱氨酸;设此多肽分子含甘氨酸y个,则含丙氨酸101-51-y=50-y,有101×100=51×121+75y+79×(50-y),解得y≈5,因此三种氨基酸的数量比5:45:51.
故答案为:
(1)49
(2)1
(3)22、23、49 17、31、32
(4)101 5:45:51
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