玻片标本的制作方法

制作玻片标本对认识生物体的形态结构具有重要意义。玻片标本有临时玻片标本（如涂片、压片、临时装片）和永久玻片标本（如永久装片、切片）。 1．涂片法涂片法是将材料均匀地涂布在载玻片上的一种制片方法。涂片材料有单细胞生物、小型藻类、血液、细菌培养液、动植物的疏松组织、精巢、花药等。涂片时应注意：（1）载玻片必须清洁。（2）载玻片要持平。（3）涂层须均匀。涂抹液滴在载玻片中间偏右，用解剖刀刃或牙签等涂匀。（4）涂层要薄。用另一载玻片作推片，沿滴有涂抹液的载玻片面（二载玻片夹角应为30°～45°）由右向左轻轻推动，涂成均匀一薄层。（5）固定。如需固定可用化学固定剂或干燥法（细菌）固定。（6）染色。细菌用亚甲基蓝，血液用瑞氏染液。染色液要盖住全部涂面。（7）冲洗。用吸水纸吸干或烤干。（8）封片。长期保存用加拿大的树胶片片。 2．压片法压片法是将生物材料置于载玻片和盖片之间，施加一定压力，将组织细胞压散的一种制片方法。压片法的一般过程：（1）取材。观察细胞分裂，应选取细胞分裂旺盛、新鲜的组织细胞为材料。如根尖、茎尖分生组织、骨髓细胞、花药（花粉母细胞）。精巢（精母细胞）等。（2）固定。材料固定可根据需要而定，取材后立即压片观察，可不作单独固定处理（与染色同步进行）；取材后不立即视察，可将材料用固定液（一般用醋酸酒精固定液）固定。固定2～24小时（因材料而异）后用95％乙醇清洗，保存于70％乙醇中，备用。（3）离析。对细胞不易散开材料用水解分离液（如1N HCl或盐酸一酒精液）处理，一般处理6～20min，解离后经水漂洗后方能染色。（4）染色。染色剂种类很多。观察染色体常用醋酸洋红染色液染色。（5）压片。将材料放在载玻片上，加一滴清水或染液，盖上盖玻片用拇指轻轻压片。（6）观察。压片后，即可在显微镜下观察。 3．装片法装片法是将生物材料采取整体封固制成玻片标本的方法，用此法可制成临时或永久装片。装片材料有：微小生物如衣藻、水绵、变形虫、水螅，植物的叶表皮；昆虫的翅、足、口器，人的口腔上皮细胞等。装片法制作时应注意：（1）手持载玻片时，应注意持平，或放在平台上。滴水时水量要适当，以恰好被盖玻片盖满为度。（2）应将材料用解剖针或镊子展开不使重叠，展平在同一平面上。（3）放盖玻片时，从一侧慢慢盖在水滴上，防止出现气泡。（4）染色时，将一滴染色液滴在盖玻片的一侧，用吸水纸从另一侧吸引，使盖玻片下的标本均匀着色。着色后，用同样的方法，滴一滴清水，把染色液吸出后，在显微镜下观察。

参考资料：

1．切片——用从生物体上切取的薄片制成的。

2．涂片——用液体的生物材料（如细菌培养液、血液）经过涂抹制成的。

3．装片——用从生物体上撕下或挑取的少量材料制成的。以上三种玻片标本，都可以分为永久的（可以长期保存）和临时的（不用长期保存）。玻片标本的制作，需要用载玻片（托载标本的玻璃片）和盖玻片（覆盖标本的玻璃片）。

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制作微生物玻片标本通常采用涂片法，微生物包括细菌和真菌（或包括病毒），细菌个体小，通常用涂片法制作玻片标本。

涂片法是装片法制作玻片标本的一种方法。制作方法是：①细菌可以用细菌液均匀地涂布在载玻片上，盖上盖片直接观察或干燥后染色观察，染色观察通常需要洗去染色液后观察。

②制作真菌标本可以采用涂片法、撕片法、贴片法和切片法。单细胞或孢子或菌丝采用涂片法；大型真菌有较大的组织块，可以采用撕片法（如撕取一部分蘑菇丝）、贴片法（将蘑菇的菌褶贴到载片上）和切片法（切片的方式观察蘑菇的结构）。

涂片时应注意：

①载玻片必须清洁。

②载玻片要持平。

③涂层须均匀。涂抹液滴在载玻片中间偏右，用解剖刀刃或牙签等涂匀。

④涂层要薄。用另一载玻片作推片，沿滴有涂抹液的载玻片面（二载玻片夹角应为30°～45°）由右向左轻轻推动，涂成均匀一薄层。

⑤固定。如需固定可用化学固定剂或干燥法（细菌）固定。

⑥染色。细菌用亚甲基蓝，血液用瑞氏染液。染色液要盖住全部涂面。

⑦冲洗。用吸水纸吸干或烤干。

⑧封片。长期保存用加拿大的树胶片片。

玻片标本是生物标本的一种从保存时间长短分,有临时玻片标本和永久玻片标本从制作的方法来分,有切片、装片、涂片和压片等

切片 是用从生物体上切取的薄片制成的玻片标本,如椴树茎的永久横切片

涂片 即用涂布的方法将动、植物中比较疏松的组织均匀地涂布在载玻片上制成的玻片标本,如血涂片

装片 用微小的生物或从生物体上撕下、挑取的少量材料制成的玻片标本,如草履虫装片、洋葱表皮临时装片

压片 是将植物或动物比较疏松的材料,用较小的压力压碎在载玻片上使成一薄层的一种玻片标本

从制作方法可以看出,他们的不同,主要是看材料的状况,

比较致密一些的一般做切片,疏松得就做成涂片,只用少量材料或者材料比较小的 应该做装片

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