有哪些容易做的微生物实验

有哪些容易做的微生物实验,第1张

做革兰氏染色吧!比较简单又有一定的技术含量。

一、实验步骤

革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤,具体操作方法是:

1)涂片固定。

2)草酸铵结晶紫染1分钟。

3)自来水冲洗。

4)加碘液覆盖涂面染约1分钟。

5)水洗,用吸水纸吸去水分。

6)加95%酒精数滴,并轻轻摇动进行脱色,20秒后水洗,吸去水分。

7)蕃红梁色液(稀)染2分钟后,自来水冲洗。干燥,镜检。

二、实验原理:通过结晶紫初染和碘液媒染后,在细胞壁内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物,革兰氏阳性菌由于其细胞壁较厚、肽聚糖网层次较多且交联致密,故遇乙醇或丙酮脱色处理时,因失水反而使网孔缩小,再加上它不含类脂,故乙醇处理不会出现缝隙,,因此能把结晶紫与碘复合物牢牢留在壁内,使其仍呈紫色;而革兰氏阴性菌因其细胞壁薄、外膜层类脂含量高、肽聚糖层薄且交联度差,在遇脱色剂后,以类脂为主的外膜迅速溶解,薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫与碘复合物的溶出,因此通过乙醇脱色后仍呈无色,再经沙黄等红色染料复染,就使革兰氏阴性菌呈红色。

三、染色结果

革兰氏正反应菌体都呈紫色,负反应菌体都呈红色。

微生物实验包含的内容很广养微生物还算是容易,后面的操作有时候会比较麻烦尤其是真菌的实验还有会让人比较郁闷的是要防止染菌

其实在生物学实验中,做微生物算是相对容易和简单的了速度也比较快

至于做微生物实验中的一些浓度之类的问题,其实也就是两种解决途径,一种是用好的仪器,定量的电动取液器或移液枪就搞定了;如果条件简陋,那就努力提高实验技能了

防腐体系效能挑战实验

1、CTFA推荐的防腐单次挑战试验

CTFA推荐的经典的为期28天的防腐单次挑战实验,是将防腐剂混入配方基质中,然后一次性接入若干种类、一定数量的微生物进行挑战,将样品存放于适当的温度下,定期抽样检测其中残存的微生物,并根据微生物的数量变化情况评价样品的抗菌效果。

2、试验仪器

恒温培养箱、显微镜、灭菌平皿:直径为9cm、pH计、高压灭菌锅、酒精灯、锥形烧瓶、量筒、灭菌刻度吸管:10ml、2ml、1ml;试管。

3、培养基和试剂

生理盐水、SCDLP液体培养基、卵磷脂、吐温80-营养培养基。

4、挑战用微生物

提取菌珠:杂菌由实验室从污染产品中得出菌种。

菌种培养:实验前,将各菌种接种于合适的培养基中,于37℃(细菌)培养箱中培养。细菌培养48小时,挑选典型的菌落于灭菌的液体培养基中制成一定浓度的细菌和霉菌混合悬液,置于冰箱冷藏备用。

5、微生物挑战实验

称取8种化妆品基质样品各100克,加入灭菌的容器内,加入混合细菌悬液,充分混匀。每克样品含细菌量为5×106CFU/克或CFU/ml。然后置于28℃下。在接菌的0、7、14、21、28天取样分析:准确称取10克样品,加到含有玻璃小球和90ml灭菌生理盐水的锥形瓶内,充分震荡混匀,此悬液为1:10稀释液;然后再用生理盐水按1:10依次稀释。按平板倾注法计数样品中含菌量细菌培养37℃下48小时。

6、判定标准

1、第28天时,样品中含细菌>103cfu/g(ml),该样品不能通过微生物攻击的挑战性实验,表明样品的防腐体系不能有效地起到抑制微生物的作用,产品在生产、贮藏和使用中很容易受到微生物的污染。

2、第28天时,样品中含细菌在102cfu/g(ml)-103cfu/g(ml),该样品有条件地通过挑战性实验,即当产品中蛋白质或其它动植物材料成分不是特别高,同时生产的卫生环境符合要求,包装物不易发生二次污染时,该防腐体系可以使用,否则不能。

3、第28天,样品中含细菌在10cfu/g(ml)-102cfu/g(ml),表明该样品的防腐体系对微生物有较强的抑杀效果,通过挑战试验,产品在生产、贮藏和使用时不容易受到微生物污染。

4、从第7天起,样品中的细菌<10cfu/g(ml),说明该样品的防腐体系对微生物有特强的抑杀作用,通过挑战试验,产品在生产、贮藏和使用时很不容易被微生物污染。

 微生物实验室主要用于无菌环境下微生物提纯、分离、增殖及鉴定等工作,对无菌环境的要求很高。那么微生物实验室中则需要用到以下仪器设备。

一、无菌室

无菌室是实验室的核心部分,主要为样品提供保护,保证实验结果的准确和人员的安全。

二、超净工作台

微生物的培养都是在特定培养基中进行无菌培养,那么无菌培养必然需要超净工作台提供一个无菌的工作环境。超净工作台的主要用途是微生物的接种及处理时的无菌操作。

三、高压蒸汽灭菌锅

高压蒸汽灭菌锅是一个密闭的、可以耐受一定压力的双层金属锅。一般在进行无菌操作前需要将操作器皿、培养基等在高压灭菌锅里进行灭绝后才能使用。

四、培养箱

培养箱主要用于实验室微生物的培养,为微生物的生长提供一个适宜的环境。培养箱有以下几种:

1、普通培养箱

2、生化培养箱

3、恒温恒湿箱

4、厌氧培养箱

五、天平

天平是用于精确称量各类试剂及药品的设备。实验室常用的是电子天平。

六、微波炉/电炉

其主要作用是用于溶液的快速加热,微生物固体培养基的加热溶化等。

七、摇床

摇床又称摇瓶机,它是培养好气性微生物的小型试验设备或作为种子扩大培养之用。

八、冰箱

冰箱是实验室中保存试剂和样品必不可少的仪器。微生物学实验中用到的试剂有些要求是4度保存,有些要求是负20度保存,实验人员一定要看清试剂的保存条件,放置在恰当的温度下保存。

九、显微镜

微生物个体微小,必须借助显微镜才能观察清楚它们的个体形态和细胞结构。因此,在微生物学的各项研究中,显微镜就成为不可缺少的工具。

十、生物安全柜

微生物实验中所涉及到的部分试剂和样品微生物有些是有毒的,对于操作人员来说伤害比较大。为了防止有害德悬

十一、菌落计数器

菌落计数仪可帮助操作者计数菌落数量。通过放大,拍照,计数等方式来准确的获取菌落的数量。有些高性能的菌落计数器还可直接连接电脑来完成自动计数的操作,方便快捷的计数。

十二、分光光度计

分光光度计在微生物试验中用于测定微生物悬液的浓度,可以正确选取合适的培养时间。

十三、离心机

离心机是用于收集微生物菌体以及其他沉淀物。有冷冻离心机和常温离心机之分。

十四、液氮罐

液氮罐里装有液氮,可用于微生物实验室中各菌种的长期保存。

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