固体培养基,液体培养基,半固体半液体培养基的作用

固体培养基,液体培养基,半固体半液体培养基的作用,第1张

固体培养基能形成单菌落,用于单克隆菌株筛选,比如转化,划线等等

液体培养基是用于不需要挑选单克隆的大规模养菌

似乎很少人会使用半固体半液体培养基这个名词

顶层琼脂的琼脂含量通常只有固体培养基的一半

是用来做病毒噬菌斑用的,不知道你是不是说得这个

YPD培养基YPD 或YEPD,:Yeast Extract Peptone Dextrose Medium(1L),又叫酵母浸出粉胨葡萄糖培养基,加入琼脂的又叫酵母膏胨葡萄糖(YPD)琼脂培养基 用于酵母菌的培养 配方:1% Yeast Extract(酵母膏) ,2% Peptone(蛋白胨) ,2% Dextrose (glucose)(葡萄糖),若制固体培养基,加入2%琼脂粉 配制方法:1 溶解10gYeast Extract(酵母膏),20gPeptone(蛋白胨)于900ml水中,如制平板加入20g琼脂粉 2 高压 121度 20min 3 加入100ml 20gDextrose (glucose)(葡萄糖),(葡糖糖溶液灭菌后加入) 注:葡萄糖,yeast extract ,peptone溶液混合后在高温下可能会发生化学反应,导致培养基成分变化,所以要分别灭菌后再混合葡萄糖可以过滤除菌,也可以115℃15min灭菌YPD另外一种配方:2%Trypton(胰化胨或称胰蛋白胨)、2%Dextrose (glucose)(葡萄糖),若制固体培养基,加入2%琼脂粉,115℃15min灭菌液体YPD培养基可常温保存;琼脂YPD平板在 4℃可保存几个月加入Zeocin 100ug/ml,成为YPDZ培养基,可以4℃条件下保存1~2 周YPEG:除了用3%乙醇和3%甘油代替葡萄糖作为碳源外,其他成分同YPD YPDZ 是在YPD的基础上加上ZEOCIN抗生素YPDA 是在YPD的基础上加0003%的腺嘌呤硫酸盐

液体培养基需要预培养。在培养中不能确定你配置好的培养基没有受到污染。在要求最严格的地方培养基上是一个菌落都不能生长的,而万一培养基上有污染而产生了菌落,就造成了错误判断。此外,预培养还能将培养基及玻璃皿上的水气蒸发掉,避免某些可能的污染。培养24小时,急用的话过夜培养也可以。第二天观察培养基上无菌落生长,则证明可以使用,反之则应该丢弃。

液体培养基( liquid culture medium),固体培养基的对应词,是微生物或动植物细胞的液状培养基。它具有进行通气培养、振荡培养的优点。在静止的条件下,在菌体或培养细胞的周围,形成透过养分的壁障,养分的摄入受到阻碍。由于在通气或在振荡的条件下,可消除这种阻碍以及增加供氧量,所以有利于细胞生长,提高生产量。

简介

培养基(Medium)是供微生物、植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料,一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐(包括微量元素)以及维生素和水等。有的培养基还含有抗菌素和色素,用于单种微生物培养和鉴定。

液体培养基是培养基物理分类一种,是相对固体培养基而言的,是微生物或动植物细胞的液状培养基。在液体培养基中的培养称为液中培养、液体培养或液内培养。

培养基由于配制的原料不同,使用要求不同,而贮存保管方面也稍有不同。一般培养基在受热、吸潮后,易被细菌污染或分解变质,因此一般培养基必须防潮、避光、阴凉处保存。对一些需严格灭菌的培养基(如组织培养基),较长时间的贮存,必须放在3~6℃的冰箱内。

配制培养基的原则

根据培养目的需要选择适宜的营养物质

由于微生物营养类型复杂,不同微生物有不同的营养要求。因此,要根据不同微生物的营养需求选择适宜的营养物质,配制针对性强的培养基。

自养微生物有较强的合成能力,能以简单的无机物如co2和无机盐合成复杂的细胞物质。因此,培养自养微生物的培养基应由简单的无机物组成。

异养微生物的合成能力较弱,不能以CO2作为唯一碳源或主要碳源,故应在培养基中至少添加一种有机物。

1配料

配方换算→在容器中加入少量水〔蒸馏水,自然水〕→按照配方称取各种药品〔依次加入〕→加足所需水量《一药一勺,取药后立即盖上瓶盖》。

2溶解

淀粉溶解:少量冷水调成糊状

加热溶解,特别是加有琼脂的培养基,一定要煮沸,琼脂的熔解温度95~97℃ ,且需要边

加热边搅拌以防止烧焦。

3调PH

用1N的盐酸或的1N NaOH把培养基调节到所要求的值。

4过滤

滤纸或棉花进行过滤。

5分装

一般培养基放在三角瓶或试管中灭菌使用。

(1)三角瓶

若作静置培养,则100 ml培养基/250 ml的三角瓶,最多不能超过150 ml培养基/250 ml的

三角瓶,否则灭菌时培养基沸腾容易污染棉塞,造成染菌;若作摇瓶培养,则15~20 ml培养基/250

ml的三角瓶,保证通气良好。

(2)试管分装

液体培养基一般装4~5 ml,约试管的1/4高度;

固体斜面培养基一般装3~4 ml,约试管的1/5高度。

6包扎

分装好后,塞上棉塞,在用牛皮纸将棉塞包裹好,防止灭菌时水份进入把棉塞弄湿。

7灭菌

按配方上要求的温度、压力进行高压蒸汽灭菌。如果灭菌的温度太高,营养成分会被破坏,培养

基中的糖、氨基酸会使培养基的颜色变深。

8摆斜面

灭菌后需要摆斜面的试管要趁热斜着摆放,使其凝固成为一个斜面,约占试管长度的1/2。

9贮存

培养基在30℃下放置一天,无污染的即可使用。一般用牛皮纸包裹好存放于2-8℃冰箱中备用

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